服務(wù)熱線(xiàn)
021-59989018
歡迎訪(fǎng)問(wèn)上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號:
廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:404
更新時(shí)間:2025-04-09
人直腸黏膜上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
直腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7164 |
細胞簡(jiǎn)介:
人直腸黏膜上皮分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內。上端平第3骶椎處接續乙狀結腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過(guò)盆膈,下端以而終。直腸上端的大小似結腸,其下端擴大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,最下端變細接。直腸在盆腔內的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周?chē)嘀?、無(wú)縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側。直腸的動(dòng)脈血供主要是來(lái)自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈,來(lái)自髂內動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來(lái)自髂內動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。腸黏膜上皮細胞是機體內外環(huán)境的重要屏障,持續暴露于大量抗原中,也是機體面對病原微生物的道防線(xiàn)。因此,腸黏膜上皮細胞除有吸收、分泌和轉運等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機制中也起著(zhù)重要作用。腸黏膜上皮細胞作為首先接觸抗原的細胞,在黏膜免疫反應的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應的發(fā)生、性質(zhì)和強度。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人直腸黏膜上皮采用先機械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人直腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠核因子κB抑制蛋白α(IKB-α)試劑盒 96T/48T
小鼠核因子κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠核因子-κB亞基p65親和肽(NF-κBp65)試劑盒 96T/48T
小鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒 96T/48T
小鼠抗中性粒細胞核周抗體(pANCA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human hydrocoisone (HYD) ELISA Kit 人輕化1(HYD)試劑盒
Humancarbohydrate-deficieansferrin,CDTELISAKit 人糖缺失性轉鐵蛋白(CDT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanalpha-L-fucosidase,AFU試劑盒人αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒規格:96T/48T
植物二(MDA)比色法定量試劑盒50次
MonkeyMacrophageMigrationInhibitoryFactor,MIFELISAKit巨噬細胞移動(dòng)抑制因子(MIF)試劑盒規格:96T/48T
DNA拓普西異構酶ⅡA抗體
高遷移率族蛋白2樣蛋白1抗體
ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein
補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)
DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白
補體1抑制因子(C1INH)重組蛋白 Recombinant Complement 1 Inhibitor (C1INH)
DMP1 Protein Human 重組人 DMP1 蛋白
ESAM重組小鼠 ESAM / Endothelial Cell Adhesion Molecule 蛋白 Protein
PDGFRB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFRB / PDGFR-1 蛋白
DCTPP1重組人 XTP3TPA / DCTPP1 蛋白 Protein
人直腸黏膜上皮細胞大鼠脯酰羧肽酶(PRCP)試劑盒 ,英文名: PRCP ELISA Kit
Mouse niic oxide (NO) ELISA Kit 小鼠血清(NO)試劑盒
Ratalpha-L-fucosidase,AFUELISAKit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGPI(Humanglucose-6-phosphateisomerase)ELISAKit人葡萄糖60酸異構酶
細胞凋亡誘導(DNA合成抑制)試劑盒20次
Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。