技術(shù):通過(guò)PCR擴增特定基因突變位點(diǎn),結合測序或熒光探針?lè )治觥?/div>
腫瘤分子診斷
致癌基因檢測:如EGFR、KRAS、BRCA1/2突變檢測,指導靶向治療。
微小殘留病灶(MRD)監測:通過(guò)PCR定量檢測術(shù)后循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)。
應用:液態(tài)活檢、腫瘤早篩、治療療效評估。
2、科學(xué)研究
基因表達分析
mRNA定量:通過(guò)熒光定量PCR(qPCR)檢測基因表達水平,研究疾病發(fā)生機制或藥物作用。
差異表達分析:比較正常與疾病組織、處理組與對照組的基因表達差異。
基因組編輯驗證
CRISPR/Cas9編輯后檢測:PCR擴編輯位點(diǎn),結合測序驗證基因敲除、插入或修復效果。
應用:基因功能研究、轉基因動(dòng)物/植物鑒定。
分子克隆與測序
PCR產(chǎn)物直接克?。簲U增目的片段后克隆到質(zhì)粒載體中,用于后續實(shí)驗(如蛋白表達、抗體制備)。
測序模板制備:通過(guò)PCR擴增目標區域,作為Sanger測序或高通量測序(NGS)的模板。
3、環(huán)境與食品安全
環(huán)境監測
污染物檢測:通過(guò)PCR檢測水中微生物(如大腸桿菌、弧菌)、土壤中的重金屬耐受基因。
生態(tài)研究:分析特定物種(如瀕危動(dòng)物、入侵生物)的分布,通過(guò)環(huán)境DNA(eDNA)進(jìn)行物種鑒定。
食品安全檢測
食源性病原體:檢測食品中的沙門(mén)氏菌、李斯特菌、諾如病毒等。
轉基因成分鑒定:通過(guò)PCR檢測大豆、玉米等作物中的轉基因序列(如CaMV 35S啟動(dòng)子、NOS終止子)。
摻假識別:鑒別肉類(lèi)、乳制品、蜂蜜等食品的真偽(如物種特異性PCR)。
4、農業(yè)與畜牧業(yè)
病害防控
植物病害:檢測水稻條紋葉枯病毒、小麥銹病、柑橘黃龍病等病原體。
動(dòng)物疫?。涸\斷流感、口蹄疫、非洲豬瘟等傳染病。
品種鑒定與育種
基因分型:通過(guò)PCR-SNP分析鑒別作物或畜禽品種(如雜交水稻純度檢測)。
分子標記輔助育種:利用PCR篩選與優(yōu)良性狀(如抗蟲(chóng)、抗旱)相關(guān)的基因標記。
5、法醫學(xué)與親子鑒定
DNA指紋分析
STR分型:通過(guò)PCR擴增短串聯(lián)重復序列(如CODIS系統),用于個(gè)體識別、現場(chǎng)物證分析。
線(xiàn)粒體DNA檢測:用于毛發(fā)、骨骼等微量樣本的身份鑒定。
親子鑒定
通過(guò)PCR擴增多個(gè)基因位點(diǎn)(如D21S11、TH01),計算親權概率。
6、特殊場(chǎng)景應用
微量樣本檢測
降解DNA樣本:通過(guò)高靈敏度PCR試劑盒,從痕量、降解的DNA中擴增目標基因(如古DNA、法醫樣本)。
單細胞PCR:擴增單細胞基因組,研究細胞異質(zhì)性或稀有細胞類(lèi)型。
現場(chǎng)快速檢測
便攜式PCR儀:結合凍干試劑盒,用于野外或基層醫療單位的即時(shí)檢測(如瘧疾、登革熱)。
數字PCR(dPCR):絕對定量檢測低頻突變或拷貝數變異(CNV),應用于液體活檢、微生物計數。