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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠小腸血管內皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7147 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠小腸血管內皮分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內,上連胃幽門(mén),下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過(guò)小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動(dòng)的機械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運動(dòng)。血管內皮細胞除了吞噬異物、細菌、壞死和衰老的組織等,還參與集體免疫活動(dòng),包括:①血管收縮及血管舒張,從而控制血壓;②凝血(血栓形成及纖維蛋白溶解);③動(dòng)脈硬化;④血管生成;⑤炎癥及腫脹(浮腫);⑥內皮細胞亦控制一些物質(zhì),如白血球進(jìn)出血管。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠小腸血管內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠小腸血管內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠褪黑素(MT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠熱休克因子1(HSF1)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠血小板因子3(PF-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠透明質(zhì)酸結合蛋白(HABP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (RANKL) ELISA Kit 大鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)試劑盒
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit 人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickensolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCR試劑盒雞可溶性血管內皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞PDGF-A蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFibrinogen,FbgELISAKit小鼠血纖蛋白原(Fbg)試劑盒規格:96T/48T
鈣/鈣調素依賴(lài)蛋白激酶2α抗體
神經(jīng)調節蛋白3抗體
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
熱休克蛋白47(HSP47)重組蛋白 Recombinant Heat Shock Protein 47 (HSP47)
CFH Protein Human 重組人 Complement Factor H / CFH 蛋白
EPHB4重組人 EphB4 / HTK 蛋白 Protein
NA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (R292K mutation) (高活性)
FAM20B重組人 FAM20B / Gxk1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
大鼠小腸血管內皮細胞大鼠組蛋白乙?;D移酶1(HAT1)試劑盒 ,英文名: HAT1 ELISA Kit
Nude mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 裸鼠蛋酸酶(PP)試劑盒
MouseIerleukin-7,IL-7ELISAkit 小鼠白介素7(IL-7)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanmajorhistocompatibilitycomplexI,MHCI/HLAIELISAKit人主要組織相容性復合體Ⅰ類(lèi)
土壤α活性DNS比色法定量試劑盒20次
ELISAKitACA-IgM大鼠抗心0脂抗體IgM
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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