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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠小腸平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小腸組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7174 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠小腸平滑肌分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門(mén)與胃相通,下端通過(guò)闌門(mén)與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤(pán)曲于腹腔內,上連胃幽門(mén),下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關(guān)重要的,因為食物經(jīng)過(guò)小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運動(dòng)的機械性消化后,基本上完成了消化過(guò)程,同時(shí)營(yíng)養物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開(kāi)口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似,絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細胞的收縮是負責腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運動(dòng)。小腸平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。小腸平滑肌肉瘤是起源于小腸壁肌層、黏膜下肌層和腸壁血管平滑肌的惡性腫瘤,是小腸結締組織惡性腫瘤中常見(jiàn)的一種。因此,體外小腸平滑肌細胞的培養對研究小腸平滑肌肉瘤提供了基礎和前提。此外,體外培養細胞,由于影響因素較為單一,是研究細胞功能以及相應的細胞信號轉導機制的基礎。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠小腸平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠小腸平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠褪黑素 英文名稱(chēng): Mouse Melatonin 規格: 英文縮寫(xiě): MLT
小鼠金屬硫蛋白 英文名稱(chēng): Mouse Metallothionein 規格: 英文縮寫(xiě): MET
小鼠尿微量白蛋白 英文名稱(chēng): Mouse Microalbunminuria 規格: 英文縮寫(xiě): MAU
小鼠黏膜選擇素黏附分子1 英文名稱(chēng): Mouse Mucosal Vascular Addressin Cell Adhesion Molecule 1 規格: 英文縮寫(xiě): MADCAM-1
小鼠透明質(zhì)酸(HA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human heparan sulfate (HS) ELISA Kit 人類(lèi)肝素(HS)試劑盒
Humanformylmethionine,fMetELISAKit 人甲酰甲硫(fMet)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickensolubleE-selectin,sE-selectin試劑盒雞可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞PDGF-B蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mouseferritin,FEELISAKit小鼠鐵蛋白(FE)試劑盒規格:96T/48T
富含亮重復序列/Ⅲ型纖維連接蛋白4抗體
神經(jīng)內分泌轉化酶2抗體
SOST重組大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein
Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原
YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CFHR1 Protein Human 重組人 CFHR1 蛋白
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白
Hpt/HP(haptoglobin 0.5mgHpt/HP(haptoglobin) 結合珠蛋白/觸珠蛋白抗原
CFHR1 Protein Human 重組人 CFHR1 蛋白
SOST重組大鼠 Sclerostin / SOST 蛋白 Protein
MIF Protein Mouse 重組小鼠 MIF / Migration Inhibitory Factor 蛋白
YES1重組人 c-Yes / YES1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠小腸平滑肌細胞大鼠組酸豐富糖蛋白(HRG)試劑盒 ,英文名: HRG ELISA Kit
Nude mouse Clara cell protein (CC16) ELISA Kit 裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒
Mouseamyloidbetapeptide1-42,Aβ1-42ELISAKit 小鼠β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanLymeIgGELISAKit人萊姆IgG
土壤(lithium)酶連續循環(huán)反應比色法定量試劑盒20次
ELISAKitASMA大鼠抗平滑肌抗體
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