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更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠滑膜成纖維細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
滑膜 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8024 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠滑膜成纖維分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節腔內面的內襯結構,各種關(guān)節內疾病均會(huì )累及滑膜。而滑膜細胞是維持關(guān)節正常功能的重要組織結構,同時(shí)在各種關(guān)節疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節炎(OA)以關(guān)節軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節的各個(gè)組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節的退變?;ぜ毎菢嫵苫拥淖畲蠹毎后w,是維持關(guān)節正常功能的重要組織結構,它包埋在顆粒狀無(wú)定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內有分散的纖維分布?;び?span>A型(巨噬樣滑膜細胞)、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹(shù)突細胞樣滑膜細胞)細胞組成?;ぜ毎饕δ埽孩倩ぜ毎a(chǎn)生潤滑液成分,并且與關(guān)節腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān);②滑膜細胞增生,表現為不依賴(lài)于支持物生長(cháng),并且分泌大量的效應分子來(lái)促進(jìn)炎癥和關(guān)節損壞;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò )中效應因子的一部分。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的小鼠滑膜成纖維采用混合酶消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的小鼠滑膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠滑膜成纖維體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
豬圓環(huán)病毒Ⅱ型(PCV-Ⅱ)核酸試劑盒 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
豬乙型腦病毒(JEV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
豬血栓素A2(TXA2)試劑盒
Human tendon protein R (TN-R) ELISA Kit 人肌腱蛋白R(TN-R)試劑盒
Rabbitadrenomedullin,ADMELISAKit 兔子腎上腺髓質(zhì)素(ADM)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforai-toxIgM(Humanai-toxoplasmaIgGaibody)ELISAKit人抗弓形體IgM抗體
血小板因子4(PlateletFactorIV)活性比色法定量試劑盒20次
Porcineiercellularadhesionmolecule3,ICAM-3ELISAKit豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒
8號染色體開(kāi)放閱讀框72抗體
豬藍耳病病毒GP5蛋白抗體
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉錄因子抗原
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽) Protein
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽)
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
BOb-1(B-cell oct-binding protein 1 0.5mgBOb-1(B-cell oct-binding protein 1) B細胞特異性轉錄因子抗原
BLNK Protein Human 重組人 BLNK / Ly-57 / SLP-65 蛋白 (His 標簽)
TIMP1重組小鼠 TIMP1 / TIMP / CLGI 蛋白 Protein
CLEC4F Protein Rat 重組大鼠 CLEC4F / CLECSF13 蛋白
ASGR1重組人 ASGPR1 / ASGR1 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠滑膜成纖維細胞大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgM(GAD-Ab-IgM)試劑盒 ,英文名: GAD-Ab-IgM ELISA Kit
Rabbit ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 兔子白介素9(IL-9)試劑盒
粘附性大腸桿菌(EAEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
CLIAKitformIgM(HumanmembraneIgM)ELISAKit人表面膜免疫球蛋白M
體液賴(lài)(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitAE禽腦脊髓
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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