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更新時(shí)間:2025-04-09
兔支氣管上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
支氣管 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7991 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級分枝,由氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長(cháng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線(xiàn),不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細胞,還作為效應細胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應。支氣管上皮細胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機制中均起著(zhù)重要的作用。體外培養的原代支氣管上皮細胞因與體內組織在形態(tài)結構和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎及臨床研究中極為重要。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔支氣管上皮采用-混合消化法結合機械刮刷并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔支氣管上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬肉毒堿脂酰轉移酶(CACT)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬生長(cháng)激素(GH)ELISA 試劑盒
Human kallikrein 10 (KLK 10) ELISA Kit 人10(KLK 10)試劑盒
GuineapigovalbuminspecificIgG,OVAsIgGELISAKit 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforANG-1ELISAKit大鼠血管生成素1
血液氧化酶(DAO)活性熒光定量試劑盒20次
Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit豬內皮素1(ET-1)試劑盒
eIF4A1蛋白抗體
雙特異性磷酸酶2抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原
JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 Protein
B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白
SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標簽)
Podoplanin Protein 平足蛋白抗原 0.5mgPodoplanin Protein 平足蛋白抗原
B3GALT5 Protein Human 重組人 B3GALT5 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/Chicken/Hong Kong/G9/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
SELE Protein Human 重組人 E-Selectin / CD62e / SELE 蛋白 (His & Fc 標簽)
JAG1重組人 JAG1 / Jagged 1 / CD339 蛋白 Protein
兔支氣管上皮細胞大鼠肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒 ,英文名: Tn-Ⅰ ELISA Kit
Rabbit P53 (P53) ELISA Kit 兔p53(p53)試劑盒
牛(BCV)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMousesinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體
體液鈣離子濃度熒光定量試劑盒20次
ELISAKit6-OHDA人6-羥多巴胺
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行