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更新時(shí)間:2025-04-09
兔支氣管平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
支氣管 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7769 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔支氣管平滑肌分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由支氣管分出的各級分枝,由支氣管分出的一級支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細長(cháng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)支氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和支氣管還有以區別就是,支氣管是以“C"型的支氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管平滑肌細胞主要功能:①支氣管平滑肌細胞能維持支氣管張力,保持支氣管形態(tài);②支氣管平滑肌特異的超微結構特點(diǎn)和調節機制是支氣管正常生理功能的基礎;③支氣管平滑肌通過(guò)分泌細胞因子和趨化因子等促炎介質(zhì),發(fā)揮免疫調節功能。支氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔支氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔支氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔支氣管平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬補體蛋白3(C3)ELISAKit ELISA.
豬骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit ELISA.
豬上腺素(EPI)ELISAKit ELISA.
豬脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA.
豬(T)ELISA 試劑盒
Human haptoglobin / haptoglobin (Hpt/HP) ELISA Kit 人結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒
PorcineHeatShockProtein70,HSP-70ELISAKit 豬熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha-FodrinIgG/IgAELISAKit大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA
血液精(arginine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次
phytohaemagglinin,PHAELISAKit植物血凝素(PHA)試劑盒
EB病毒核抗原-3B抗體
受體輔助蛋白1抗體
FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標簽) Protein
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類(lèi)免疫缺陷病毒1型(抗原)
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標簽) Protein
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標簽)
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
HIV-1(human immunodeficiency virus type 1 0.5mgHIV-1(human immunodeficiency virus type 1) 艾滋病病毒-1/人類(lèi)免疫缺陷病毒1型(抗原)
ANGPT4 Protein Human 重組人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 蛋白 (His 標簽)
FCGR1重組大鼠 CD64 / FCGR1A 蛋白 (His 標簽) Protein
IFNG Protein Mouse 重組小鼠 IFNG / Interferon Gamma 蛋白
SCGN重組人 SCGN / Secretagogin 蛋白 (His 標簽) Protein
兔支氣管平滑肌細胞大鼠肌鈣蛋白I(TNI)試劑盒 ,英文名: TNI ELISA Kit
Rat 17 hydroxycoicosteroids (17-OHCS) ELISA Kit 大鼠17羥皮質(zhì)類(lèi)固醇(17-OHCS)試劑盒
RatCollagenaseIELISAKit 大鼠膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforET-1(HumanEndothelin1)ELISAKit人內皮素1
細胞亮(leucine)含量比色法定量試劑盒20次
Ratmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)試劑盒