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更新時(shí)間:2025-04-09
兔視網(wǎng)膜Muller細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
視網(wǎng)膜 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7865 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔視網(wǎng)膜Muller分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,兩層間在病理情況下可分開(kāi),稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò )膜緊密相連,由色素上皮細胞組成,它們具有支持和營(yíng)養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內分別為:色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經(jīng)節細胞層、神經(jīng)纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜,有感光作用;后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層,專(zhuān)司感光,它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上,而視錐細胞則在中心凹處最多。層叫雙節細胞,約有10到數百個(gè)視細胞通過(guò)雙節細胞與一個(gè)神經(jīng)節細胞相聯(lián)系,負責聯(lián)絡(luò )作用。第三層叫節細胞層,專(zhuān)管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構,它貼于眼球的后壁部,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區,其分辨能力。視網(wǎng)膜Muller細胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細胞的90%,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著(zhù)何種作用也受到越來(lái)越多的關(guān)注。在超微結構水平上,Muller細胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細胞更高的電子密度,更發(fā)達的內質(zhì)網(wǎng),細胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,Muller細胞形態(tài)也會(huì )有所差異的。視網(wǎng)膜Muller細胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結構和功能的作用,并調制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),還能參與多種病理過(guò)程,尤其是眼底增殖性病變,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養Muller細胞是研究這些增殖性病變途徑之一。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔視網(wǎng)膜Muller采用膠原酶消化法和反復消化法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔視網(wǎng)膜Muller經(jīng)GS免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔視網(wǎng)膜Muller體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子促甲狀腺素(TSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子雌二醇(E2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子表皮生長(cháng)因子(EGF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat neuroophin 4 (-4) ELISA Kit 大鼠神經(jīng)營(yíng)養因子4(-4)試劑盒
HumanOsteoprotegerinLigand,OPGLELISAKit 人骨保護素配體(OPGL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancaspaseactivateddeoxyribonuclease,CAD試劑盒人胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)試劑盒規格:96T/48T
轉基因油菜(canola)GT73品系試劑盒20次
humansimilaoRIKENcDNA4931408D14geneELISAKit人類(lèi)似RIKENcDNA4931408D14基因試劑盒規格:96T/48T
5-羥色胺轉運蛋白抗體
脯羥化酶抗體
ACVR1重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor 0.5mgFAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島細胞因子(抗原)
GAD1重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 Protein
GNGT1 Protein Human 重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白
CNDP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白
FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor 0.5mgFAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島細胞因子(抗原)
GNGT1 Protein Human 重組人 GNGT1 / GNG1 蛋白
ACVR1重組大鼠 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CNDP2 Protein Mouse 重組小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 蛋白
GAD1重組人 GAD67 / GAD1 蛋白 Protein
兔視網(wǎng)膜Muller細胞大鼠交聯(lián)物(PY)試劑盒 ,英文名: PY ELISA Kit
Mouse beta hexosaminidase A (beta -hexosaminidase A) ELISA Kit 小鼠β氨基己糖苷酶A(β-hexosaminidase A)試劑盒
ELISA 小鼠堿性成纖維生長(cháng)因子(mouse b-FGF/FGF-2) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforKAF/ARELISAKit大鼠角化細胞內分泌因子/雙調蛋白
通用型蛋白巰基/結合巰基含量熒光定量試劑盒20次
ELISAKitMBP大鼠主要堿性蛋白
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