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更新時(shí)間:2025-04-09
兔神經(jīng)干細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 球形 | YS-01X7997 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔神經(jīng)干分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著(zhù)每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)干細胞具有分化為神經(jīng)神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞的能力,能自我更新,并足以提供大量腦組織細胞的細胞群。神經(jīng)干細胞是一類(lèi)具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過(guò)不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類(lèi)細胞。需要強調的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細胞類(lèi)型產(chǎn)生的子代細胞種類(lèi)不同,分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統大部分類(lèi)型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長(cháng)的時(shí)間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統損傷修復和再生研究的熱點(diǎn),體外建立穩定的神經(jīng)干細胞培養模型是其基礎和臨床應用的前提。神經(jīng)干細胞在培養3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養基中呈懸浮生長(cháng),予以更換半量培基,1周后用吸管輕柔吹打球形克隆成為小的神經(jīng)球和單細胞懸液,將部分細胞接種到新的培養瓶中,2×105個(gè)細胞/瓶,每7-10d傳代1次,每隔3d離心更換半量培養基1次,培養條件不變。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔神經(jīng)干采用消化后差速貼壁,結合神經(jīng)干細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔神經(jīng)干經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:懸浮
細胞形態(tài):球形
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%,Accutase
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔神經(jīng)體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠C-肽 英文名稱(chēng): C-peptide 規格: 英文縮寫(xiě): C-peptide
小鼠心肌肌鈣蛋白 英文名稱(chēng): cardiac oponin 1 規格: 英文縮寫(xiě): cTn1
小鼠粒細胞集落刺激因子 英文名稱(chēng): granulocyte colony-stimulating factor 規格: 英文縮寫(xiě): G-CSF
小鼠粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子 英文名稱(chēng): granulocyte-macrophage colony-stimulating factor 規格: 英文縮寫(xiě): GM-CSF
小鼠谷酸脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human retinoblastoma tumor suppressor protein (pRB) ELISA Kit 人視網(wǎng)膜母細胞瘤抑制蛋白(pRB)試劑盒
HumanleukoieneD4,LT-D4ELISAKit 人白三烯D4(LTD4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-septolysinO,ASO試劑盒人抗鏈球菌溶血素O/抗O(ASO)試劑盒規格:96T/48T
植物纖維素酶(cellulase)活性比色法定量試劑盒20次
HumanoponinⅠ,Tn-ⅠELISAKit人肌鈣蛋白Ⅰ(Tn-Ⅰ)試劑盒規格:96T/48T
17號染色體開(kāi)放閱讀框78抗體
腦膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白2抗體
HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽
VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein
FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白
CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白
PAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide 0.5mgPAR-2 OP(Protease-activated receptors-2 Activating Orange-peptide) 蛋白酶激活受體-2桔抗肽
FASLG Protein Human 重組人 Fas Ligand / FASLG / CD95L 蛋白
HA重組甲型流感 H9N2 (A/HongKong/1073/99) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
CD80 Protein Human 重組人 CD80 / B7-1 蛋白
VEGFA重組人 VEGF 183 / VEGF-A 蛋白 Protein
兔神經(jīng)干細胞大鼠巨嗜細胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒 ,英文名: MCP-1/CCL2/MCAF ELISA Kit
Mouse haptoglobin / haptoglobin (Hpt/HP) ELISA Kit 小鼠結合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)試劑盒
Mousephospho-exacellularsignal-regulatedkinase,pERKELISAKit 小鼠0酸化細胞外信號調節激酶(pERK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanparamyxovirusparotitisIgGELISAKit人腮腺病毒IgG
同位素標記放射活性TCA試劑盒20次
ELISAKitAMPK大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶
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