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更新時(shí)間:2025-04-09
人肺動(dòng)脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺動(dòng)脈 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8188 |
細胞簡(jiǎn)介:
人肺動(dòng)脈平滑肌分離自肺動(dòng)脈組織;肺動(dòng)脈亦稱(chēng)肺動(dòng)脈干。在呼吸空氣的脊椎動(dòng)物中,把靜脈血由心臟導向肺臟的動(dòng)脈。肺動(dòng)脈起于右心室,在主動(dòng)脈之前向左上后方斜行,在主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈,經(jīng)肺門(mén)入肺。肺動(dòng)脈干位于心包內,為一粗短的動(dòng)脈干。起自右心室,在升主動(dòng)脈前方向左后上方斜行,至主動(dòng)脈弓下方分為左、右肺動(dòng)脈。左肺動(dòng)脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動(dòng)脈較長(cháng)而粗,經(jīng)升主動(dòng)脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門(mén)處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。肺動(dòng)脈平滑肌細胞是肺血管的重要結構細胞之一,在調控肺血管的收縮和舒張功能中有重要作用。肺動(dòng)脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。肺動(dòng)脈平滑肌細胞的異常是肺動(dòng)脈高壓發(fā)生發(fā)展的重要病理學(xué)特征,其凋亡和增殖失衡是肺血管重塑的關(guān)鍵。研究表明,急性和慢性缺氧均可導致肺動(dòng)脈高壓,即缺氧性肺動(dòng)脈高壓,推斷缺氧可能是通過(guò)促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細胞的增殖而參與缺氧性肺動(dòng)脈高壓的發(fā)生發(fā)展。肺動(dòng)脈平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動(dòng)脈疾病的靶細胞。肺動(dòng)脈平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓;②先天性肺動(dòng)脈狹窄;③肺動(dòng)脈栓塞。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的人肺動(dòng)脈平滑肌采用 - 膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的人肺動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
人肺動(dòng)脈平滑肌細胞體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的最佳培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T
兔子膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T
兔子堿性成纖維細胞生長(cháng)因子(bFGF)試劑盒 96T/48T
兔子甲狀腺素(T4)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)試劑盒
HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1試劑盒人心肌錨蛋白重復域1(ANKRD1)試劑盒規格:96T/48T
重組腺病毒載體轉染試劑盒10次
HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)試劑盒規格:96T/48T
膜突蛋白抗體
整合素β1(CD29)抗體
SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白
KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標簽)
IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)
GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白
SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 Protein
KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標簽)
BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 Protein
人肺動(dòng)脈平滑肌細胞大鼠胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF1)試劑盒 ,英文名: IGF1 ELISA Kit
Mouse brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營(yíng)養因子(BDNF)試劑盒
Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人唾液
細胞BLK激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1A
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