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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎動(dòng)脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7238 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌分離自腎動(dòng)脈組織;腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈,穿行于腎柱內,上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細血管,并向周?chē)哪I小體發(fā)出入球小動(dòng)脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng),再匯集成出球小動(dòng)脈,出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門(mén)出腎,注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養血管,又是腎的機能血管,與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內形成兩個(gè)毛細血管網(wǎng):腎小球毛細血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過(guò)形成原尿;球后毛細血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈平滑肌細胞是腎動(dòng)脈的重要結構細胞之一,在機體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。腎動(dòng)脈平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠腎動(dòng)脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠腎動(dòng)脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
植物激素脫落酸(ABA)ELISAKit ELISA.
植物K1(VK1)ELISAKit ELISA.
植物B12(VB12)ELISAKit ELISA.
植物A(VA)ELISAKit ELISA.
植物纖維素酶(CE)試劑盒
Human ai calmodulin specific aibody (CAM-ab) ELISA Kit 人抗鈣調素特異抗體(CAM-ab)試劑盒
Porcineendothelin1,ET-1ELISAKit 豬內皮素1(ET-1)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAFP-L3ELISAKit小鼠小扁結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3
血液A含量比色法定量試劑盒20次
Mousethyroidstimulatinghormonereceptoraidoby,AbELISAKit小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)試劑盒
白介素21受體抗體
卵泡刺激素結合蛋白1抗體
ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白
三葉因子1(TFF1)重組蛋白 Recombinant Trefoil Factor 1 (TFF1)
ADH7 Protein Human 重組人 CAMK2A / CAMKA 蛋白 (GST 標簽)
ERBB3重組人 HER3 / ErbB3 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/VietNam/1203/2004) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 蛋白
DHRS9重組人 DHRS9 蛋白 (His 標簽) Protein
大鼠腎動(dòng)脈平滑肌細胞人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA 試劑盒
Rat apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 大鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒
Humanai-hepatitisDvirusaibody,ai-HDVELISAKit 人抗丁型肝病毒抗體(ai-HDV)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanHeatShockProtein60,HSP-60試劑盒人熱休克蛋白60(Hsp-60)試劑盒
組織副氏菌A(SalmonellaParatyphiA)定量PCR擴增試劑盒20次
HumanMaixmetalloproteinase3,MMP-3ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP-3)試劑盒
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