產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品型號：

廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：305

更新時(shí)間：2025-04-09

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產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠腎動(dòng)脈內皮細胞

組織來(lái)源：腎組織

產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

培養信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡(jiǎn)介：

大鼠腎動(dòng)脈內皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì)，如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節水、電解質(zhì)平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩定，使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈，穿行于腎柱內，上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處，形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細血管，并向周?chē)哪I小體發(fā)出入球小動(dòng)脈，進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細血管網(wǎng)，再匯集成出球小動(dòng)脈，出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細血管網(wǎng)，再匯合成直小靜脈，入弓狀靜脈、葉間靜脈，后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門(mén)出腎，注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營(yíng)養血管，又是腎的機能血管，與腎泌尿機能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內形成兩個(gè)毛細血管網(wǎng)：腎小球毛細血管網(wǎng)，血壓較高，利于血漿濾過(guò)形成原尿；球后毛細血管網(wǎng)，血壓較低，利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈內皮細胞是腎動(dòng)脈的重要結構細胞之一，在機體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用。腎動(dòng)脈內皮細胞主要功能有：①在血漿濾過(guò)形成原尿的過(guò)程中起重要作用，②在腎小管的重吸收過(guò)程中起重要作用，③保持凝血和纖溶的動(dòng)態(tài)平衡。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗室分離的大鼠腎動(dòng)脈內皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗室分離的大鼠腎動(dòng)脈內皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。

收到細胞如何處理？

1、首先，觀(guān)察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題，部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時(shí)，以便穩定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細胞密度超過(guò)80%，可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過(guò)80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

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