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更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠子宮內膜間質(zhì)細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8080 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠子宮內膜間質(zhì)分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì )陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱(chēng)為基質(zhì)細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層不可剝脫。子宮內膜構成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的最內層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養的子宮內膜間質(zhì)細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的小鼠子宮內膜間質(zhì)采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的小鼠子宮內膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠子宮內膜間質(zhì)體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子結合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子主要組織相容性復合體Ⅲ類(lèi)(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔淋巴細胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β內酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat somatostatin (SS) ELISA Kit 大鼠(SS)試劑盒
HumanCollagenaseIELISAKit 人膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCeruloplasmin,CP/CER試劑盒人銅藍蛋白(CP/CER)試劑盒規格:96T/48T
轉基因玉米MON810品系試劑盒20次
HumanSerotonin,STELISAKit人血清素/血清胺(ST)試劑盒規格:96T/48T
LYPD3抗體
過(guò)氧化氫誘導轉錄蛋白1抗體
IFNA2重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 Protein
IRF-1(Interferon regulatory factor-1 0.5mgIRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調節因子抗原
FLRT2重組人 FLRT2 蛋白 Protein
GPNMB Protein Human 重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標簽)
IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標簽)
IRF-1(Interferon regulatory factor-1 0.5mgIRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調節因子抗原
GPNMB Protein Human 重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標簽)
IFNA2重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 Protein
IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標簽)
FLRT2重組人 FLRT2 蛋白 Protein
小鼠子宮內膜間質(zhì)細胞大鼠成纖維細胞生長(cháng)因子23(FGF-23)試劑盒 ,英文名: FGF-23 ELISA Kit
Mouse B cell lymphoma factor 2 (Bcl-2) ELISA Kit 小鼠B細胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(mouse sCD40L) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLepIgG(HumanLeptospiraIgG)ELISAKit人鉤端IgG
通用型HSV(HERPESSIMPLX)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitIL-1白介素1
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