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更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠滋養層干細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤(pán)組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7444 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠滋養層干分離自胎盤(pán)組織;胎盤(pán)(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內膜聯(lián)合長(cháng)成的母子間交換物質(zhì)的過(guò)渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤(pán)從母體取得營(yíng)養,而雙方保持相當的獨立性。胎盤(pán)還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內分泌器官。有些爬行類(lèi)和魚(yú)類(lèi)也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長(cháng)出一些輔助結構如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結合,以達到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結構稱(chēng)假胎盤(pán)。滋養層干細胞是胎盤(pán)組織細胞的祖細胞,與胚胎著(zhù)床和胎盤(pán)的形成密切相關(guān)。胚胎著(zhù)床和胎盤(pán)形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關(guān)鍵時(shí)期,此時(shí)期滋養層細胞增殖速度快,滋養層干細胞自我更新和分化旺盛,與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調節的失常有密切關(guān)系。在哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過(guò)程中,胚胎細胞次分化形成內細胞團和滋養外胚層。滋養層干細胞是胎盤(pán)細胞的前體細胞,在胎盤(pán)發(fā)育中有重要作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的小鼠滋養層干采用囊胚組織貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的小鼠滋養層干經(jīng)HLA-E(白細胞抗原)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
土壤纖維素酶(S-CL)測試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
土壤酶(S-CAT)測試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
土壤還原酶(S-)測試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
土壤蔗糖酶(S-SC)測試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人原A(PG-A)試劑盒
HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏前列腺特異性抗原(PSA-US)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGF試劑盒人結締組織生長(cháng)因子(CTGF)試劑盒規格:96T/48T
組織CDK5/P35激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanProteinZELISAKit人蛋白Z(ProteinZ)試劑盒規格:96T/48T
Kelch樣蛋白17抗體
谷脫氫酶2抗體
GLYCOPROTEIN重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53誘導糖酵解和凋亡調節因子蛋白(抗原)
CD7重組人 CD7 蛋白 Protein
IFNA2 Protein Human 重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
ERAP2 Protein Human 重組人 LRAP / ERAP2 蛋白
TIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator 0.5mgTIGAR humen (TP53- induced glycolysis and apoptosis-regulator ) P53誘導糖酵解和凋亡調節因子蛋白(抗原)
IFNA2 Protein Human 重組人 Interferon alpha 2 / IFNA2 蛋白
GLYCOPROTEIN重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白 Protein
ERAP2 Protein Human 重組人 LRAP / ERAP2 蛋白
CD7重組人 CD7 蛋白 Protein
小鼠滋養層干細胞大鼠遲現抗原(VLA)試劑盒 ,英文名: VLA ELISA Kit
Mouse 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA Kit 小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷(8-OHdG)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLEPR(HumanLeptieceptor)ELISAKit人瘦素受體
通用型HRP-DAB底物顯色試劑盒10次
ELISAKitFSH促卵泡素
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