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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:354
更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠關(guān)節軟骨細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
關(guān)節軟骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7318 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠關(guān)節軟骨分離自關(guān)節軟骨組織;關(guān)節軟骨屬于透明軟骨,表面光滑、呈淡藍色、有光澤,它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架,這種框架呈半環(huán)形,類(lèi)似拱形球門(mén),其底端緊緊附著(zhù)在下面的骨質(zhì)上,上端朝向關(guān)節面,這種結構使關(guān)節軟骨緊緊與骨結合起來(lái)而不會(huì )掉下來(lái),同時(shí)當受到壓力時(shí)候,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間,散在分布著(zhù)軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,這些軟骨細胞維持關(guān)節軟骨的正常代謝。關(guān)節軟骨沒(méi)有神經(jīng)支配,也沒(méi)有血管,其營(yíng)養成分必須從關(guān)節液中取得,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節液中,關(guān)節軟骨的這種營(yíng)養代謝必須通過(guò)關(guān)節運動(dòng),使關(guān)節軟骨不斷的受到壓力刺激才行,所以關(guān)節運動(dòng)對于維持關(guān)節軟骨的正常結構起重要的作用。關(guān)節軟骨細胞位于關(guān)節軟骨陷窩內。幼稚的關(guān)節軟骨細胞位于關(guān)節軟骨組織的表層,單個(gè)分布、體積較小、呈橢圓形,長(cháng)軸與關(guān)節軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見(jiàn)數量不一的脂滴。成熟的關(guān)節軟骨細胞多2-8個(gè)成群分布于關(guān)節軟骨陷窩內,這些關(guān)節軟骨細胞由同一個(gè)母細胞分裂增殖而成,稱(chēng)為同源細胞群。電鏡下,關(guān)節軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內有大量的粗面內質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線(xiàn)粒體。在組織切片中,關(guān)節軟骨細胞收縮為不規則形,在軟骨囊和細胞之間出現較大的腔隙。體外培養的關(guān)節軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的小鼠關(guān)節軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的小鼠關(guān)節軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血紅素氧化酶 英文名稱(chēng): heme oxygenase-1 規格: 英文縮寫(xiě): HO-1
熱休克蛋白27 英文名稱(chēng): Heat shock protein 27 規格: 英文縮寫(xiě): HSP27
熱休克蛋白70 英文名稱(chēng): Heat shock protein 70 規格: 英文縮寫(xiě): HSP70
HA絲酸肽酶1 英文名稱(chēng): high temperature requireme A 規格: 英文縮寫(xiě): Ha 1
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒
Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥(niǎo)苷
乙酸待測樣品處理試劑盒20次
Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過(guò)氧化物酶(MPO)試劑盒規格:96T/48T
13號染色體開(kāi)放閱讀框38抗體
整合素β1(CD29)重組兔單克隆抗體
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
小鼠關(guān)節軟骨細胞大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 ,英文名: BMPR-Ⅱ ELISA Kit
Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
流感嗜血桿菌(Hi)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈
體液脊髓過(guò)氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20次
ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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