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更新時(shí)間:2025-04-09
小鼠肝內膽管上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7153 |
細胞簡(jiǎn)介:
小鼠肝內膽管上皮分離自肝臟組織;肝臟是身體內以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著(zhù)去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官,位于機體中的腹部位置,在右側橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構:肝臟位于右上腹,隱藏在右側膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復蓋,僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過(guò)控制激素調控的分泌和吸收,在保持、調整和擴大膽小管的結構中發(fā)揮重要作用,肝內膽管上皮細胞在先天性和獲得性免疫應答方面起著(zhù)積極作用。肝內膽管上皮細胞約占肝細胞總數的5%,其在肝內膽道系統內形成復雜的網(wǎng)狀管形結構。肝內膽管上皮細胞具有復雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過(guò)程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用。研究表明,常見(jiàn)的肝內膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內膽管上皮細胞為病變靶位,進(jìn)而引起肝內膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內膽管上皮細胞的生物學(xué)特征和病變肝內膽管上皮細胞的病理特征對研究肝內膽管病變的發(fā)病機制、診斷和治療具有重要意義。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的小鼠肝內膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后,再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化,接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中,通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的小鼠肝內膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
氧化酶(XOD)測試盒(比色法)
植物二(MDA)測定試劑盒(比色法)
(VitaminE)測定試劑盒(比色法)
超微量Na+K+–ATP酶測定試劑盒
鴨白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai bactericidal permeability increasing protein aibody (BPI-Ab) ELISA Kit 人抗殺菌通透性蛋白抗體(BPI-Ab)試劑盒
HumanVasoactiveIestinalPeptide,VIPELISAKit 人血管活性腸肽(VIP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACO-2(Humanaconitase2)ELISAKit人烏頭酸酶2
煙草葉片原生質(zhì)細胞分離試劑盒5次
Mouseplasmin-aiplasmincomplex,PAPELISAKit小鼠纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒規格:96T/48T
SRPX2蛋白抗體
血管非炎性蛋白2抗體
CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein
CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
含RNA結合冷休克域蛋白E1(CSDE1)重組蛋白 Recombinant Cold Shock Domain Containing Protein E1, RNA Binding (CSDE1)
CAMK4 Protein Human 重組人 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (GST 標簽)
CNTN5重組小鼠 Contactin 5 / CNTN5 蛋白 Protein
CD40LG Protein Canine 重組狗 CD40L / CD154 / TNFSF5 蛋白 (Fc 標簽)
PROS1重組人 PROS1 / Protein S 蛋白 Protein
小鼠肝內膽管上皮細胞大鼠胱抑素S(CST4)試劑盒 ,英文名: CST4 ELISA Kit
Rabbit apolipoprotein E (Apo-E) ELISA Kit 兔載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒
乙型流感病毒(IBV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
CLIAKitforMMP-5(Humanmaixmetalloproteinase5)ELISAKit人基質(zhì)金屬蛋白酶5
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitVK1犬K1
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