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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
小鼠肝竇內皮細胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
小鼠肝竇內皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：胞外基質(zhì)蛋白3抗體 鋅指蛋白3抗體 轉鈷胺素蛋白2抗體 小鼠鞏膜成纖維細胞 大鼠胰島β細胞 IGR-1人黑素瘤細胞 DMS 114人小細胞肺癌細胞
產(chǎn)品型號：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：345
更新時(shí)間：2025-04-09
產(chǎn)品特性Product characteristics
小鼠肝竇內皮細胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肝臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X7161 |
細胞簡(jiǎn)介：
小鼠肝竇內皮細胞分離自肝臟組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著(zhù)去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態(tài)結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。肝竇內皮細胞（SEC）是肝臟內所占比例最高的非實(shí)質(zhì)細胞，位于肝竇腔與肝細胞之間，具有物質(zhì)轉運、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于擁有一般細胞所沒(méi)有的窗孔結構、細胞間連結松散、內皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，從而達到快速交換各種大小分子的目的。肝在遭到多種病原侵襲時(shí)，肝竇內皮細胞窗孔逐漸減少或消失，內皮下基膜形成，產(chǎn)生類(lèi)似于連續型毛細血管的結構，這一過(guò)程稱(chēng)為肝竇毛細血管化。它由多種因素引起，其過(guò)程極復雜，在多種肝病的發(fā)病前期階段均有出現，近年來(lái)受到廣泛關(guān)注。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗室分離的小鼠肝竇內皮采用混合酶灌流消化、反復低速離心、密度梯度離心法，并通過(guò)內皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗室分離的小鼠肝竇內皮經(jīng)CD31、CD14免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時(shí)，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種：
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
總蛋白定量測定試劑盒（帶標準：BCA法）（比色法）
總超氧化物歧化酶（SOD）測定試劑盒（WST-1法）
乳酸（lacticacid）測定試劑盒（測血清、組織等）（比色法）
羥脯酸（Hyp）測定試劑盒（堿水解法）（測動(dòng)物血清、組織、尿液）
豬孕酮(PROG)試劑盒
Human erythrocyte membrane protein (EMP) ELISA Kit 人紅細胞膜蛋白(EMP)試劑盒
RabbitComplemefragme3a,C3aELISAKit 兔子補體片斷3a(C3a)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAPF(Humanai-perinuclearfactor)ELISAKit人抗核周因子抗體
血清鈣比色法定量試劑盒50次
PorcineIerleukin6,IL-6ELISAKit豬白介素6(IL-6)試劑盒
SBNO2蛋白抗體
胸苷激酶2抗體
IL1B重組食蟹猴 IL-1 beta / IL1B 蛋白 Protein
MMP-9(matrix metalloproteinase 9 0.5mgMMP-9(matrix metalloproteinase 9) 基質(zhì)金屬蛋白酶-9(抗原)
WFDC2重組人 WAP5 / WFDC2 / HE4 蛋白 (His 標簽) Protein
BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)
HGF Protein Mouse 重組小鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 (His 標簽)
泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白 Recombinant Ubiquitin Activating Enzyme E1 Like Protein (UBE1L)
BTK Protein Human 重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標簽)
NXPH1重組小鼠 Neurexophilin-1 / NXPH1 蛋白 (His 標簽) Protein
IGFBP2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP2 蛋白 (His 標簽)
PFN2重組人 Profilin 2 / PFN2 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠肝竇內皮細胞大鼠果糖胺(FRA)試劑盒 ，英文名： FRA ELISA Kit
Rabbit inducible niic oxide syhase (iNOS) ELISA Kit 兔誘導型合成酶(iNOS)試劑盒
新型甲型H1N1流感病毒(IAV-H1N1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè )?span>) 48T
CLIAKitforMMP-8(HumanMaixmetalloproteinase8/Neuophilcollagenase)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶8/粒細胞膠原酶
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitTM犬血栓調節蛋白
原代細胞的培養條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；
2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；
4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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