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更新時(shí)間:2025-04-09
兔子宮平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7144 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔子宮平滑肌分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì )陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮肌層比較厚,由成束或成片的平滑肌組成,肌束間以結締組織分隔。子宮平滑肌具有收縮功能,收縮受激素的調節,其收縮活動(dòng)有助于向輸卵管運送、經(jīng)血排出以及胎兒娩出。子宮平滑肌層含有大量的血管,如果平滑肌層細胞過(guò)度生長(cháng),勢必造成血管壁的增厚,管腔堵塞,體外培養平滑肌細胞有利于研究子宮和其他富含血管器官的血管形成機制。子宮平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。子宮平滑肌細胞的主要功能:①子宮平滑肌能保持子宮的基本形態(tài),在孕期能的擴張子宮容積,保證胎兒孕育環(huán)境;②平滑肌細胞有收縮舒張能力,在生產(chǎn)時(shí)能形成生理性的縮腹環(huán),推動(dòng)胎兒向下移動(dòng),輔助生產(chǎn)。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的兔子宮平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合組織貼塊法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的兔子宮平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬胰島素樣生長(cháng)因子2(IGF-2)ELISAKit ELISA.
豬胰島素樣生長(cháng)因子1(IGF-1)ELISAKit ELISA.
豬胰島素(INS)ELISAKit ELISA.
豬血小板活化因子(PAF)ELISAKit ELISA.
豬血管生成素受體Tie2(ANG-R-Tie2)ELISA 試劑盒
Human creatine kinase (CK) ELISA Kit 人肌酸激酶(CK)試劑盒
RabbitD-Dimer,D2DELISAKit 兔子D二聚體(D2D)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforai-RVIgG(Humanai-rubellavirusIgGaibody)ELISAKit人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體
血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性間接比色法定量試劑盒20次
PorcineInsulin,INSELISAKit豬胰島素(INS)試劑盒
FSCB蛋白抗體
天連接糖基化11抗體
KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標簽) Protein
TGFβ誘導早期應答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)
RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標簽) Protein
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)
MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白
C4結合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標簽)
ADAM15重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標簽) Protein
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標簽)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 Protein
兔子宮平滑肌細胞大鼠活化蛋白C(APC)試劑盒 ,英文名: APC ELISA Kit
Rabbit Leptospira IgG (Lebtospira) ELISA Kit 兔鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒
腦膜奈瑟菌通用型(NM-U)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMouseneurofilameprotein,NFELISAKit小鼠神經(jīng)絲蛋白
體液(GLATHIONE)總濃度熒光定量試劑盒50次
ELISAKitColⅡ人Ⅱ型膠原
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