產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

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廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：738

更新時(shí)間：2025-04-09

兔椎間盤(pán)纖維環(huán)細胞

商品屬性：

細胞簡(jiǎn)介：

兔椎間盤(pán)纖維環(huán)分離自椎間盤(pán)組織；椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間，由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個(gè)密封體。上下有軟骨板，是透明軟骨復蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái)。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實(shí)的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環(huán)的前側及兩側較厚，而后側較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶，后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個(gè)細胞/mm3，其外層的細胞呈梭型，主要屬于纖維細胞，內層細胞呈圓形，主要屬于軟骨細胞。在培養的情況下，用透射電鏡觀(guān)察則有許多共同的超微結構表現，它們的核較圓，核仁較明顯。細胞質(zhì)內可見(jiàn)大量的附有核糖體顆粒的粗面內質(zhì)網(wǎng)和滑面內質(zhì)網(wǎng)。細胞質(zhì)內線(xiàn)粒體多，為橢圓形，有的可看到雙層單位膜，由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質(zhì)內有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒，纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛，保證纖維環(huán)生理代謝活動(dòng)所需的構造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少，纖維環(huán)的生物性能就會(huì )減弱，椎間盤(pán)開(kāi)始退變。

原代細胞的培養條件：

　　一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養

　　1、細胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；

　　3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；

　　7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí)，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細胞培養

　　1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞；

　　2、短期培養，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行；

　　3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進(jìn)行分瓶試驗；

　　4、長(cháng)期培養時(shí)，淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長(cháng)；

　　5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗室分離的兔椎間盤(pán)纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結合軟骨細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗室分離的兔椎間盤(pán)纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養法

　　組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。

　?、?消化培養法

　?、?懸浮細胞培養法

　　對于懸浮生長(cháng)的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。

　?、芷鞴倥囵B

　　器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節作用。

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