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更新時(shí)間:2025-04-09
兔牙周膜干細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
牙周膜 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7970 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔牙周膜干分離自牙周膜組織;牙周膜(牙周韌帶、牙周間隙)是由致密結締組織所構成。多數纖維排列成束,纖維的一端埋于牙骨質(zhì)內,另一端則埋于牙槽窩骨壁里,使牙齒固位于牙槽窩內;牙周膜內有神經(jīng)、血管、淋巴和上皮細胞等。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái)。間充質(zhì)干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來(lái)源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,具有很強的自我復制和多向分化潛能,具有向脂肪細胞、成骨細胞、軟骨細胞及肌細胞等多種終末細胞定向分化的能力,運用 MSCs來(lái)修復軟骨損傷具有很好的應用前景,目前已能夠從骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉等組織以及羊水、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細胞。牙周膜干細胞參與了牙周組織的病變、修復及再生過(guò)程?,F在,利用牙周膜干細胞建立體外模型,已經(jīng)成為有關(guān)員研究牙周組織疾病的重要手段。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔牙周膜干采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔牙周膜干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基:含FBS、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔牙周膜干體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠前列腺素F(PGF)試劑盒 96T/48T
小鼠前列腺素E2(PGE2)試劑盒 96T/48T
小鼠前列腺素E1(PGE1)試劑盒 96T/48T
小鼠遷移率族蛋白B1(HMGB-1)試劑盒 96T/48T
小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human membrane cofactor protein (MCP/CD46) ELISA Kit 人膜輔蛋白(MCP/CD46)試劑盒
Humanlow-densitylipoprotein-receptor-relatedprotein,LRP-6ELISAKit 人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白6(LRP-6)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Goatgrowthhormonereleasinghormone,GHRH試劑盒山羊促生長(cháng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母琥珀酸脫氫酶(SDH)活性比色法定量試劑盒20次
MouseCollageypeⅠ,ColⅠELISAKit小鼠Ⅰ型膠原(ColⅠ)試劑盒規格:96T/48T
cGMP依賴(lài)性蛋白激酶1抗體
神經(jīng)調節蛋白4抗體
SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MARCKS相關(guān)蛋白(MARCKSL1)重組蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)
SCN2B重組人 SCN2B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽)
食蟹猴
MARCKS相關(guān)蛋白(MARCKSL1)重組蛋白 Recombinant MARCKS Related Protein (MARCKSL1)
COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標簽)
SELPLG重組小鼠 PSGL-1 / CD162 / SELPLG 蛋白 (Fc 標簽) Protein
食蟹猴
SCN2B重組人 SCN2B 蛋白 (Fc 標簽) Protein
兔牙周膜干細胞大鼠肌肉0酸果糖激酶(PFKM)試劑盒 ,英文名: PFKM ELISA Kit
Mouse tissue type plasminogen activator (t-PA) ELISA Kit 小鼠組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒
RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit 大鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforFVIII-AgELISAKit大鼠Ⅷ相關(guān)抗原
細胞科薩基病毒A(CoxsackievirusA)定量PCR擴增試劑盒20次
RatMethemoglobin,MHBELISAKit大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒規格:96T/48T
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