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更新時(shí)間:2025-04-09
兔胸腺上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胸腺 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8100 |
細胞簡(jiǎn)介:
兔胸腺上皮分離自胸腺組織;胸腺是機體重要的淋巴器官,其功能與免疫緊密相關(guān),是T細胞分化、發(fā)育、成熟的場(chǎng)所,還可以分泌胸腺激素及激素類(lèi)物質(zhì),具有內分泌技能的器官。胸腺上皮細胞和胸腺細胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,胸腺上皮細胞組成了胸腺細胞不同發(fā)育階段的三維結構,根據其在胸腺中位置不同,可分為皮質(zhì)胸腺上皮細胞和髓質(zhì)胸腺上皮細胞。胸腺細胞的發(fā)育和成熟是通過(guò)在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細胞的遷移過(guò)程中相互作用完成的。此外,胸腺細胞通過(guò)皮質(zhì)胸腺上皮細胞介導的陽(yáng)性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細胞介導的陰性選擇發(fā)育為能夠識別和耐受自身主要組織相容復合體和自身抗原的成熟T淋巴細胞。胸腺上皮細胞是構成胸腺微環(huán)境的主要成份,其形態(tài)、分布和功能多樣。表面抗原表達具有高度異質(zhì)性,與胸腺細胞結合成不同類(lèi)型復合體,部分胸腺上皮細胞相互排列構成囊泡樣結構。電鏡觀(guān)察,可把胸腺上皮細胞分為3-6型,用抗胸腺上皮細胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細胞分為9種類(lèi)型。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗室分離的兔胸腺上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗室分離的兔胸腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基:含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(cháng)特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔胸腺上皮體外培養周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養,以此保證該細胞的優(yōu)良培養狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠α羥基脫氫酶(αHBDH)試劑盒 96T/48T
小鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒 96T/48T
小鼠αS轉移酶(α-GST)試劑盒 96T/48T
小鼠α甘露糖苷酶(αManase)試劑盒 96T/48T
小鼠漢坦病毒(HV)試劑盒 96T/48T
Adrenaline (EPI) ELISA Kit 人(EPI)試劑盒
humanEndothelin1,ET-1ELISAKit 人內皮素1(ET-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-parainfluenzavirusIgMaibody,ai-PIVIgM試劑盒人抗副流感病毒IgM抗體(ai-PIVIgM)試劑盒規格:96T/48T
植物細胞壁鈣熒光白(Calcofluorwhite;CFW)熒光染色試劑盒20次
Humayrosinekinasewithimmunoglobulin-likeandEGF-likedomains2,Tie-2ELISAKit人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長(cháng)因子樣域酪激酶2(Tie-2)試劑盒規格:96T/48T
B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子4抗體
三磷酸腺苷受體受體P2X3抗體
VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein
白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
白介素8受體α(IL8Rα)重組蛋白 Recombinant Interleukin 8 Receptor Alpha (IL8Ra)
FABP2 Protein Human 重組人 FABP2 / I-FABP 蛋白
VTCN1重組小鼠 B7-H4 / B7S1 / B7x 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PDCD1LG2 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 B7-DC / PD-L2 / CD273 蛋白
IL1R2重組人 IL1R2 / IL1RB / CD121b 蛋白 Protein
兔胸腺上皮細胞大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶16(MMP16)試劑盒 ,英文名: MMP16 ELISA Kit
Mouse histone H2b (histon-H2b) ELISA Kit 小鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒
Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit 大鼠原激活肽(TAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforF1+2(Humanprothrombinfragme1+2)ELISAkit人原片段F1+2
細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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