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更新時(shí)間:2025-04-09
人子宮內膜上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7227 |
細胞簡(jiǎn)介:
人子宮內膜上皮分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會(huì )陰中心腱等結構維持,這些結構受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂。子宮內膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,其內有大量的星形細胞,稱(chēng)為基質(zhì)細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,約占1/5,功能層可剝脫,而基底層剝脫。子宮內膜上皮細胞主要功能:①子宮內膜亦稱(chēng)子宮黏膜,是指構成哺乳類(lèi)子宮內壁的一層;②子宮內膜對動(dòng)情素和孕激素都起反應,因此可隨著(zhù)性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著(zhù)的變化。子宮內膜與胚胎附植密切相關(guān),在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話(huà)"的過(guò)程中,子宮內膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內膜構成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的最內層,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能。體外培養的子宮內膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人子宮內膜上皮采用膠原酶消化法,結合上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人子宮內膜上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠巨噬細胞來(lái)源的趨化因子(mouse MDC) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠髓過(guò)氧化物酶(mouse MPO) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠瘤病毒16(HPV-16)試劑盒 96T/48T
Human endothelial lipase (EL) ELISA Kit 人內皮脂肪酶(EL)試劑盒
Humansreumalbumin,HSAELISAKit 人血清白蛋白(HSA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSH試劑盒豚鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量試劑盒20次
MouseCholecystokinin,CCKELISAKit小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒規格:96T/48T
FITC標記小鼠CD45R單克隆抗體
核因子1A抗體
CDH1重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
CTn1 (cardiac troponin 1 0.5mgCTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
XRCC5 & XRCC6重組人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 蛋白 Protein
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白
PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白
CTn1 (cardiac troponin 1 0.5mgCTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白
CDH1重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白
XRCC5 & XRCC6重組人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 蛋白 Protein
人子宮內膜上皮細胞大鼠內向整流型離子通道亞家族J成員5(KCNJ5)試劑盒 ,英文名: KCNJ5 ELISA Kit
Mouse platelet derived growth factor AB (PDGF-AB) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長(cháng)因子AB(PDGF-AB)試劑盒
Ratai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGL3(HumanGlucoseanspoer3)ELISAKit人葡萄糖轉運蛋白3
細胞分泌型堿性0酸酶化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒20次
RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大鼠干細胞因子/肥大細胞生長(cháng)因子(SCF/MGF)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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