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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:426
更新時(shí)間:2025-04-09
人源NK細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 短梭形 | YS-01X7512 |
細胞簡(jiǎn)介:
人NK分離自人外周血單個(gè)核細胞;NK細胞即自然殺傷細胞(natural killer cell,NK)是機體重要的免疫細胞,不僅與抗腫瘤、 抗病毒感染和免疫調節有關(guān),而且在某些情況下參與超敏反應和自身免疫性疾病的發(fā)生,能夠識別靶細胞、殺傷介質(zhì)。NK細胞來(lái)源于骨髓淋巴樣干細胞,其分化、發(fā)育依賴(lài)于骨髓及胸腺微環(huán)境,主要分布于骨髓、外周血、肝、脾、肺和淋巴結。NK細胞不同于T、B細胞,是一類(lèi)無(wú)需預先致敏就能非特異性殺傷腫瘤細胞和病毒感染細胞的淋巴細胞。由于NK細胞的殺傷活性無(wú)MHC限制,不依賴(lài)抗體,因此稱(chēng)為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關(guān)。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時(shí)、體內4小時(shí)即可見(jiàn)到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒感染細胞、某些自身組織細胞(如血細胞)、寄生蟲(chóng)等,因此NK細胞是機體抗腫瘤、抗感染的重要免疫因素,也參與第Ⅱ型超敏反應和移植物抗宿主反應。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人外周血NK采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心、差速貼壁、細胞因子誘導法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人源NK經(jīng)CD56免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含IL-2、IL-15、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 懸浮
細胞形態(tài) 短梭形
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔抗糖蛋白抗體試劑盒 兔抗糖蛋白抗體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔抗糖蛋白抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗糖蛋白抗體試劑盒、兔抗糖蛋白抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔抗平滑肌抗體試劑盒 兔抗平滑肌抗體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔抗平滑肌抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗平滑肌抗體試劑盒、兔抗平滑肌抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔抗試劑盒 兔抗試劑盒 規格型號:96T/48T 兔抗試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗試劑盒、兔抗試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
兔抗腦組織抗體試劑盒 兔抗腦組織抗體試劑盒 規格型號:96T/48T 兔抗腦組織抗體試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:兔抗腦組織抗體試劑盒、兔抗腦組織抗體試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
小鼠KN-62 試劑盒 96T/48T
Rat dehydroepiandrosterone sulfate (DHEA-S) ELISA Kit 大鼠脫氫表雄酮酯(DHEA-S)試劑盒
Humangrowthhormonereleasinghormone,GHRHELISAKit 人促生長(cháng)激素釋放激素(GHRH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCollageypeⅣ,ColⅣ試劑盒人Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒規格:96T/48T
組織5-焦0酸甲戊二羥酸脫羧酶(mevalonate5-pyrophosphatedecarboxylase)活性比色法定量試劑盒20次
humaeceptoNFRSF-ieractingserine-threoninekinase2,RIPK2ELISAKit人受體TNFRSF結合絲蘇激酶2(RIPK2)試劑盒規格:96T/48T
B淋巴細胞白血病前體蛋白轉錄因子3抗體
富含亮重復蛋白8B抗體
GAD2重組小鼠 GAD65 / GAD2 蛋白 Protein
骨成型蛋白4(BMP4)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4)
SHPK重組人 CARKL / SHPK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白
TNFRSF9 Protein Canine 重組狗 CD137 / 4-1BB / TNFRSF9 蛋白 (Fc 標簽)
lamin A 核纖層蛋白A抗原 0.5mglamin A 核纖層蛋白A抗原
HMGB1 Protein Human 重組人 HMGB1 / HMG1 蛋白
REG1A重組食蟹猴 REG1A / PSPS 蛋白 Protein
IgG2b Protein Mouse 重組小鼠 IgG2b-Fc 蛋白
SELL重組人 CD62L / L-Selectin / SELL 蛋白 Protein
人源NK細胞大鼠鞘醇-1-0酸0酸酶1(SGPP1)試劑盒 ,英文名: SGPP1 ELISA Kit
Mouse angiopoietin 4 (ANG-4) ELISA Kit 小鼠血管生成素4(ANG-4)試劑盒
Ratmyelinbasicprotein,MBPELISAKit 大鼠髓0脂堿性蛋白(MBP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGS(HumanGelsolin)ELISAKit人凝溶膠蛋白
細胞單胺氧化酶(MAO)總活性熒光定量試劑盒20次
Rati-iodothyronine,T3ELISAKit大鼠三甲狀腺原(T3)試劑盒規格:96T/48T