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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
人心臟纖維原細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
心臟組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7593 |
細胞簡(jiǎn)介:
人心臟纖維原分離自心臟組織;心臟由心肌細胞和非心肌細胞組成,非心肌細胞占細胞總數的70%,其中90%以上的非心肌細胞由心肌成纖維細胞組成。纖維細胞是機能不活躍的成纖維細胞。胞體呈梭形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核小,染色深。電鏡下可見(jiàn),細胞中粗面內質(zhì)網(wǎng)和高爾基體均不發(fā)達。當組織受損時(shí),纖維細胞可轉化為成纖維細胞而參與修復過(guò)程。纖維細胞和成纖維細胞是處于不同功能狀態(tài)的同一種細胞,如在組織損傷后的修復過(guò)程中,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞。纖維細胞較小,呈多角形,胞質(zhì)較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質(zhì)網(wǎng)較少,高爾基復合體不發(fā)達。成纖維細胞較大,呈星形或梭形,有突起,細胞核呈卵圓形,染色質(zhì)稀疏,染色淡,核仁明顯,胞質(zhì)較多。成纖維細胞能合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和蛋白多糖,形成膠原纖維、彈性纖維和網(wǎng)狀纖維以及基質(zhì)成分。心肌成纖維細胞主要功能為對心肌細胞起結構支持作用并負責細胞基質(zhì)外的合成,當心肌損傷時(shí)能產(chǎn)生旁分泌生長(cháng)因子。心肌成纖維細胞是心臟結締組織中最常見(jiàn)的細胞,可合成和分泌膠原纖維、彈性纖維、網(wǎng)狀纖維及有機基質(zhì),并且在外傷等因素刺激下,部分纖維細胞可重新轉變?yōu)橛字傻某衫w維細胞,其功能活動(dòng)也得以恢復,參與組織損傷后的修復。因此,對心肌成纖維細胞的生理學(xué)研究成為現代心血管領(lǐng)域研究的一個(gè)重點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人心臟纖維原采用膠原酶消化結合差速貼壁法制備而來(lái)制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人心臟纖維原經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠結合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠6前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠戊糖素(Peosidine)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human rotavirus aigen (RV Ag) ELISA Kit 人輪狀病毒抗原(RV Ag)試劑盒
HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit 人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Duckcarbonicanhydrase,CA試劑盒鴨子酶(CA)試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞組蛋白H3-K4甲基化熒光顯微鏡試劑盒(針對二甲基、基)10/20次
MouseDopamineD1receptor,D1RELISAKit小鼠多巴胺D1受體(D1R)試劑盒規格:96T/48T
9號染色體開(kāi)放閱讀框72抗體
電壓門(mén)控鈉離子通道型α4抗體
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
ARIP2a(Activin receptor 2A 0.5mgARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
CLEC12A Protein Human 重組人 CLEC12A / CLL-1 / DCAL2 蛋白
IL36RN重組小鼠 IL1F5 / IL1RP3 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Rat 重組大鼠 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標簽)
MAPKAPK5重組人 MAPKAPK5 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
人心臟纖維原細胞大鼠乳酸脫氫酶B(LDHB)試劑盒 ,英文名: LDHB ELISA Kit
Mouse vasoactive iestinal peptide (VIP) ELISA Kit 小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒
Ratsexhormone-bindingglobulin,SHBGELISAKit 大鼠性激素結合球蛋白(SHBG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGzms-B(MousegranzymesB)ELISAKit小鼠顆粒酶B
細胞二(MDA)比色法定量試劑盒50次
RatVascularEndothelialcellGrowthFactorB,VEGF-BELISAKit大鼠血管內皮細胞生長(cháng)因子B(VEGF-B)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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