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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
人小氣道上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
小氣道組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7045 |
細胞簡(jiǎn)介:
人小氣道上皮分離自小氣道;臨床上通常將內徑小于2mm的小細支氣管稱(chēng)為小氣道。小氣道具有氣流阻力小,但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時(shí),空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部,產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無(wú)軟骨支持,在脫離纖維鞘嵌入肺組織后,管腔通暢性不象軟骨性氣道,易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細胞形成連續呼吸道內層,作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著(zhù)的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處,這些細胞在功能上能夠調節免疫反應、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達粘附分子,并可能通過(guò)HLA-DR表達呈遞抗原;它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病,如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化,都涉及呼吸道表面上皮細胞的破壞;小氣道上皮細胞的培養可為防止呼吸道擴增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道的生理功能特點(diǎn):①小氣道阻力??;②氣流速度慢;③可調節控制通氣與血流比例。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人小氣道上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人小氣道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性P-選擇素(mouse sP-Selectin/sCD62P) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠P物質(zhì)(mouse Substance P) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠催乳素(mouse PRL) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠孕(mouse PROG) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠抗復合物(TAT)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat parathyroid hormone (PTH) ELISA Kit 大鼠甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒
HumanGlucoseanspoer1,GL1ELISAKit 人葡萄糖轉運蛋白1(GL1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human2,3-Disphosphoglycerate,2,3-DPG試劑盒人2,3-二0酸甘油酸(2,3-DPG)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞總RNA分離試劑盒20次
MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒規格:96T/48T
4號染色體開(kāi)放閱讀框40抗體
蛋白酪磷酸酶非受體型22抗體
FZD10重組小鼠 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 標簽)(Fc 標簽) Protein
Angiotensin II receptor(Ang II 0.5mgAngiotensin II receptor(Ang II ) 血管緊張素Ⅱ受體(抗原)
TEK重組人 Tie2 / CD202b / TEK 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白
IL20RB Protein Rat 重組大鼠 IL20RB 蛋白 (Fc 標簽)
半胱蛋白酶抑制劑3(CST3)重組蛋白 Recombinant Cystatin 3 (CST3)
CSNK1G2 Protein Human 重組人 CSNK1G2 蛋白
CST6重組小鼠 Cystatin E / CST6 蛋白 Protein
KLRC1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 NKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1 蛋白 (Fc 標簽)
CSNK2A2重組人 CSNK2A2 / CK2A2 蛋白 Protein
人小氣道上皮細胞大鼠三葉因子2(TFF2)試劑盒 ,英文名: TFF2 ELISA Kit
Mouse signal ansduction molecule 7 (Smad7) ELISA Kit 小鼠信號轉導分子7(Smad7)試劑盒
Ratcarbonicanhydrase,CAELISAKit 大鼠酶(CA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHAase(HumanHyaluronidase)ELISAKit人透明質(zhì)酸酶
細胞半胱蛋白酶-8(CASPASE-8)活性比色法定量試劑盒20次
RatVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit大鼠血管內皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。