產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品型號：

廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：361

更新時(shí)間：2025-04-09

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產(chǎn)品名稱(chēng)：人外周血樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)

組織來(lái)源：外周血

產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

培養信息：

培養基：含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(cháng)特性：半貼壁半懸浮

細胞形態(tài)：圓形，樹(shù)突狀

傳代特性：屬于高度分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

人外周血樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)體外培養周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(cháng)培養基及正確的操作方法來(lái)培養，以此保證該細胞的最佳培養狀態(tài)。

細胞簡(jiǎn)介：

人外周血DC分離自外周血，由外周血單核細胞誘導而成的；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱(chēng)為外周血干細胞，在二十一世紀初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。樹(shù)突狀細胞分為成熟樹(shù)突狀細胞和未成熟樹(shù)突狀細胞，典型的未成熟樹(shù)突狀細胞呈半貼壁生長(cháng)，在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落，細胞大而形態(tài)不規則，表面皺褶多，亦可見(jiàn)少量短刺狀突，胞內細胞器豐富并可見(jiàn)吞噬泡，具有較強的遷移能力，伴隨有部分未誘導成的單核細胞，貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹(shù)突狀細胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導而成，多數呈懸浮生長(cháng)， 細胞呈圓形，細胞體積進(jìn)一步增大，表面大量粗細不等的樹(shù)枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀(guān)察到 )，伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長(cháng)時(shí)間培養也可能導致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無(wú)特異性細胞表面分子標志，主要通過(guò)形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進(jìn)行鑒定。其中成熟樹(shù)突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子，進(jìn)而激活T淋巴細胞，誘導免疫應答，處于啟動(dòng)、調控、并維持免疫應答的中心環(huán)節；未成熟樹(shù)突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力，但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應答，不能激活T細胞的信號，可導致T細胞無(wú)能，從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹(shù)突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類(lèi)分子等共刺激分子表達較低，一般在30%以下。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗室分離的人外周血成熟DC采用密度梯度離心法分離外周血單個(gè)核細胞、培養過(guò)程添加細胞因子誘導而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

實(shí)驗室分離的人外周血樹(shù)突狀細胞(成熟DC細胞)經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定，純度可達80%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

細胞松弛素B   `1mg

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FCGR3B Protein Human 重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白

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細胞半胱蛋白酶-2(CASPASE-2)活性比色法定量試劑盒20次

RatVitaminK1,VK1ELISAKit大鼠K1(VK1)試劑盒

收到細胞如何處理？

1、首先，觀(guān)察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題，部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時(shí)，以便穩定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細胞密度超過(guò)80%，可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過(guò)80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作