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更新時(shí)間:2025-04-09
人外周血淋巴細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
血液組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 圓形 | YS-01X7627 |
細胞簡(jiǎn)介:
人外周血淋巴分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細胞,我們把這樣得到的干細胞稱(chēng)為外周血干細胞,在二十一世紀初人類(lèi)開(kāi)始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。淋巴細胞(lymphocyte)是白細胞的一種,是體積最小的白細胞。其由淋巴器官產(chǎn)生,主要存在于淋巴管中循環(huán)的淋巴液中,是機體免疫應答功能的重要細胞成分,是淋巴系統幾乎全部免疫功能的主要執行者,是對抗外界感染和監控體內細胞變異的一線(xiàn)“士兵"。淋巴細胞是一類(lèi)具有免疫識別功能的細胞系,按其發(fā)生遷移、表面分子和功能的不同,可分為T淋巴細胞(又名T細胞)、B淋巴細胞(又名B細胞)和自然殺傷(NK)細胞。T細胞和B細胞都是抗原特異性淋巴細胞,它們的最初來(lái)源是相同的,都來(lái)自造血組織。T淋巴細胞隨血循環(huán)到胸腺,在胸腺激素等的作用下成熟,而B細胞在骨髓中分化成熟。當受抗原刺激后,T淋巴細胞即轉化為淋巴母細胞,再分化為致敏T淋巴細胞,參與細胞免疫,其免疫功能主要是抗胞內感染、瘤細胞與異體細胞等;而B淋巴細胞是先轉化為漿母細胞,再分化為漿細胞,產(chǎn)生并分泌免疫球蛋白(抗體),參與體液免疫,其功能是產(chǎn)生抗體,提呈抗原,以及分泌細胞內因子參與免疫調節;NK細胞不依賴(lài)抗原刺激而自發(fā)地發(fā)揮細胞毒效應,具有殺傷靶細胞的作用。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人外周血淋巴采用取外周血、通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人外周血淋巴經(jīng)過(guò)檢測,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豚鼠超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠表皮生長(cháng)因子(EGF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豚鼠白三烯D4(LTD4)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠促甲狀腺素(TSH)ELISA 試劑盒
Rat osteoclast differeiation factor (ODF) ELISA Kit 大鼠破骨細胞分化因子(ODF)試劑盒
Humanai-phospholipidaibody,Apl/APAELISAKit 人抗0脂抗體(Apl/APA)試劑盒 進(jìn)口分裝
Humanbetacellulin,BTC試劑盒人β細胞素(BTC)試劑盒
植物種子甲磺酸乙脂突變誘導試劑盒3次
Humaargetedribonuclease,ELISAKit人靶向核糖核酸酶()試劑盒
轉移相關(guān)蛋白2抗體
胞吞調控蛋白Eps15抗體
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標簽)
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
信號素3E(SEMA3E)重組蛋白 Recombinant Semaphorin 3E (SEMA3E)
FLT3 Protein Human 重組人 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 (His 標簽)
PLAT重組人 tPA / PLAT 蛋白 Protein
HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Anhui/1/2005) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)
VMO1重組人 VMO1 蛋白 Protein
人外周血淋巴細胞大鼠神經(jīng)型合酶(NOS1)試劑盒 ,英文名: NOS1 ELISA Kit
Mouse cyclin D2 (Cyclin-D2) ELISA Kit 小鼠細胞周期素D2(Cyclin-D2)試劑盒
RatVitaminC,VCELISAKit 大鼠C(VC)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHB-EGF(Humanheparin-bindingepidermalgrowthfactor-likegrowthfactor)ELISAKit人肝素結合性表皮生長(cháng)因子
細胞半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
Ricinuscommunisagglinin,RCAELISAKit蓖麻凝集素(RCA)試劑盒
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