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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號:
廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:381
更新時(shí)間:2025-04-09
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱(chēng):人肺成纖維細胞
組織來(lái)源:肺組織
產(chǎn)品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡(jiǎn)介:
人肺成纖維分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱(chēng)喉為肺之門(mén)戶(hù),鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái);成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動(dòng)旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著(zhù)十分重要的作用。剛分離的肺成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(cháng),不聚集成團;細胞生長(cháng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長(cháng),平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持肺器官的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復損傷組織。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的人肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的人肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
脫氧核糖核酸酶I 100mg
DNaseI,frombovinepancreas
三0酸脫氧核苷酸混合溶液 10x0.5ml
dPMix,10mMeach(dATP,dCTP,dGTP,dTTP) 100x0.5ml
小鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human peptidylprolyl CIS ans isomerase (PPI) ELISA Kit 人肽基脯氨酰順?lè )串悩嬅?span>(PPI)試劑盒
HumanvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanBcelldifferetiationfactor,BCDF試劑盒人B細胞分化因子(BCDF)試劑盒規格:96T/48T
植物源性飼料油菜籽(rapeseed)試劑盒20次
Humahrombinactivatablefibrinolysisinhibitor,TAFIELISAKit人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)試劑盒規格:96T/48T
磷脂酸磷酸酶LPIN2抗體
原鈣粘蛋白γC5抗體
CNTNAP2重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原
ENPP2重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein
FGFR4 Protein Human 重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
IL25 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽)
ATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide 0.5mgATP1b2/Na+K+ ATPase(ATPase, Na+/K+ transporting, beta 2 polypeptide) ATP酶通道蛋白抗原
FGFR4 Protein Human 重組人 FGFR4 / FGF Receptor 4 蛋白
CNTNAP2重組小鼠 CNTNAP2 / CASPR2 蛋白 Protein
IL25 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin 25 / IL25 / IL17E 蛋白 (Fc 標簽)
ENPP2重組人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 Protein
人肺成纖維細胞大鼠胰島素樣生長(cháng)因子結合蛋白5(IGFBP5)試劑盒 ,英文名: IGFBP5 ELISA Kit
Mouse endostatin (ES) ELISA Kit 小鼠內皮抑素(ES)試劑盒
MouseThrombopoietin,TPOELISAkit 小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanCyclin-D2ELISAKit人細胞周期素D2
細胞AURORA-B激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitBMP-6大鼠骨形成蛋白6
收到細胞如何處理?
1、首先,觀(guān)察細胞培養瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有,請拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續服務(wù)依據)。
2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面,顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題,部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養瓶蓋,將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時(shí),以便穩定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū),了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續服務(wù)依據);建議細胞傳代培養后,定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基,預留5ml左右繼續培養,直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內,1200rpm離心5min,離心后上清培養基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細胞密度超過(guò)80%,可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B,補加培養基至5ml;若細胞密度未超過(guò)80%,將細胞懸液移至原瓶繼續培養,直至細胞密度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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