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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:330
更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠胰腺上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
胰腺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7091 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠胰腺上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內分泌腺由大小不同的細胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細胞組成:α細胞、β細胞、γ細胞及PP細胞。α細胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細胞分泌胰島素,降低血糖;γ細胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細胞的分泌;PP細胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細胞在發(fā)育上被認為分離自?xún)扰邔右认偕掀?,在隨后的胰腺發(fā)育過(guò)程中,胰腺干細胞分化為胰島細胞(α、β、δ、PP細胞)、導管上皮細胞以及腺泡細胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來(lái)源的細胞,包括成纖維細胞、血管內皮細胞、血管平滑肌細胞以及星形細胞,其中以成纖維細胞占主要部分。要離體分離培養獲得胰腺上皮細胞就要排除間充質(zhì)來(lái)源的細胞,尤其是成纖維細胞。目前常用的去除成纖維細胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等,胰腺上皮細胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性白細胞分化抗原86(B7-2/sCD86)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原40配體(sCD40L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原30配體(sCD30L)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)試劑盒 96T/48T
小鼠受體()ELISA 試劑盒 96T/48T
Human coagulation factor XIII (F XIII) ELISA Kit 人ⅩⅢ(FⅩⅢ)試劑盒
Humananspoerassociatedwithaigenprocessing,TAPELISAKit 人抗原處理相關(guān)轉運蛋白(TAP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human2,3-dinohromboxaneB2,2,3-dinor-TXB2試劑盒人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)試劑盒規格:96T/48T
真菌/酵母細胞樣品氧化酶活性測定試劑盒20次
Mouseapoprotein,apo-A1ELISAKit小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒規格:96T/48T
基底膜相關(guān)軟骨素蛋白多糖抗體
細胞分裂周期蛋白25C抗體
CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein
內分泌腺來(lái)源血管內皮生長(cháng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein
CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標簽)
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)
內分泌腺來(lái)源血管內皮生長(cháng)因子(EG-VEGF)重組蛋白 Recombinant Endocrine Gland Derived Vascular Endothelial Growth Factor (EG-VEGF)
CSNK1G1 Protein Human 重組人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 蛋白 (His & GST 標簽)
CPA2重組人 Carboxypeptidase A2 / CPA2 蛋白 Protein
NA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (N295S mutation) (高活性)
ERBB4重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 Protein
大鼠胰腺上皮細胞大鼠腫瘤蛋白p53(TP53)試劑盒 ,英文名: TP53 ELISA Kit
Mouse soluble cell differeiation aigen 30 (sCD30) ELISA Kit 小鼠可溶性白細胞分化抗原30(sCD30)試劑盒
MouseE-SelectinELISAkit 小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanIg-likeanscriptsReceptor,ILTsRELISAKit樣轉錄體受體
微型RNA文庫數據庫(在建)會(huì )員制
ELISAKitADAM8大鼠解整合素樣金屬蛋白酶8
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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