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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠牙齦成纖維細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
牙齦組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7618 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠牙齦成纖維分離自牙齦組織;牙齦指緊貼于牙頸周?chē)班徑难啦酃巧系t色的結構,由復層扁平上皮及固有層組成。是口腔黏膜的一部分,血管豐富,呈淡紅色,堅韌而有彈性,因缺乏黏膜下層,直接與骨膜緊密相連,故牙齦不能移動(dòng)。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細胞分化而來(lái)。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動(dòng)旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著(zhù)十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(cháng),不聚集成團;細胞生長(cháng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長(cháng),平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠牙齦成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠牙齦成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔血小板活化因子(rabbit PAF) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
兔前列腺素E2(rabbit PGE2) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
兔纖溶酶原激活劑抑制物-1 (rabbit PAI-1) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
兔相關(guān)蛋白A(rabbit PAPP-A) 作用: ELISA 規格: 進(jìn)口分裝
小鼠α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat aquaporin 1 (AQP-1) ELISA Kit 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒
HumanNeonatalThyroidStimulatingHormone,N-TSHELISAKit 人新生兒促甲狀腺素(N-TSH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanChorionicGonadoophinβ,β-CG試劑盒人絨毛膜β(β-CG)試劑盒規格:96T/48T
總微型RNA(miRNA)超濾法分離試劑盒10次
HumanSalusinαELISAKit人Salusin-α試劑盒規格:96T/48T
黑色素瘤相關(guān)抗原B1抗體
同源盒蛋白轉錄因子EN1抗體
KLRK1重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標簽) Protein
MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原
FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein
GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽)
PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 標簽)
MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3 0.5mgMAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原
GUCA1A Protein Human 重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 (His & GST 標簽)
KLRK1重組食蟹猴 NKG2D / KLRK1 蛋白 (aa 78-216, His 標簽) Protein
PTN Protein Mouse 重組小鼠 Pleiotrophin / PTN / HB-GAM 蛋白 (Fc 標簽)
FCGR3B重組人 CD16b / FCGR3B 蛋白 Protein
大鼠牙齦成纖維細胞大鼠周期素依賴(lài)性激酶抑制因子1A(CDKN1A)試劑盒 ,英文名: CDKN1A ELISA Kit
Mouse ai ypsin (AT) ELISA Kit 小鼠抗(AT)試劑盒
MouseBonemorphogeneticprotein2,BMP-2ELISAKit 小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanIPO-38ELISAKit人IPO-38蛋白
微型RNA(miRNA)表達載體連接試劑盒10次
ELISAKitMIP-5大鼠巨噬細胞癥蛋白5