產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

產(chǎn)品型號：

廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商

訪(fǎng)問(wèn)量：311

更新時(shí)間：2025-04-09

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產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞

組織來(lái)源：視網(wǎng)膜組織

產(chǎn)品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

培養信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(cháng)特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

細胞簡(jiǎn)介：

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成，兩層間在病理情況下可分開(kāi)，稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò )膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營(yíng)養光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經(jīng)節細胞層、神經(jīng)纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。神經(jīng)元是視細胞層，專(zhuān)司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節細胞，約有10到數百個(gè)視細胞通過(guò)雙節細胞與一個(gè)神經(jīng)節細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡(luò )作用。第三層叫節細胞層，專(zhuān)管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區，其分辨能力強。視網(wǎng)膜色素上皮（RPE）位于脈絡(luò )膜和光感受器細胞外節之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò )膜血管之間的離子、水、營(yíng)養物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構成，排列十分規則。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長(cháng)因子，幫助維持脈絡(luò )膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細胞無(wú)再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側面滑動(dòng)，以填補死亡細胞遺留下來(lái)的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò )膜和光感受器細胞外節之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò )膜血管之間的離子、水、營(yíng)養物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉運通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長(cháng)因子，幫助維持脈絡(luò )膜血管內皮細胞和光感受器細胞的結構完整性。

方法簡(jiǎn)介：

公司實(shí)驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜色素上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法，并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái)，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜色素上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養步驟：

一、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加4-6mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過(guò)夜（或將細胞懸液加入6cm皿中），培養過(guò)夜。第二天換液并檢查細胞密度。

二、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養。

a）、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加5ml以上含10%血清的培養基終止消化。

3.輕輕吹打細胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養液，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養液的新皿中或者瓶中。

b）、對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補加1-2ml培養液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或瓶中。

方法二：可選擇半數換液方式，棄半數培養基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品：

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中文名稱(chēng)   方法   規格

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FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

FK506結合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)

IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

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收到細胞如何處理？

1、首先，觀(guān)察細胞培養瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）。

2、用75%酒精擦拭細胞培養瓶表面，顯微鏡下觀(guān)察細胞狀態(tài)。因運輸問(wèn)題，部分貼壁細胞會(huì )有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養瓶蓋，將細胞置于細胞培養箱內靜置培養2-4小時(shí)，以便穩定細胞狀態(tài)。

3、仔細閱讀細胞說(shuō)明書(shū)，了解細胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。

4、靜置完成后，取出細胞培養瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續服務(wù)依據）；建議細胞傳代培養后，定期拍照、記錄細胞生長(cháng)狀態(tài)。

5、貼壁細胞：若細胞生長(cháng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細胞培養瓶?jì)扰囵B基，預留5ml左右繼續培養，直至細胞密度達80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。

6、懸浮細胞：將細胞培養瓶?jì)纫后w全部轉移至50ml無(wú)菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細胞密度超過(guò)80%，可將細胞懸液分至2個(gè)細胞培養瓶?jì)扰囵B，補加培養基至5ml；若細胞密度未超過(guò)80%，將細胞懸液移至原瓶繼續培養，直至細胞密度達80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作