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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量:322
更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠食管平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
食管組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7115 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠食管平滑肌分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內,胸段通過(guò)膈孔與腹腔內腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結構上由內向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱(chēng)為食管上括約??;位于食管下端,一部分在膈上,穿過(guò)膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱(chēng)為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠食管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人脂蛋白a試劑盒 人脂蛋白a試劑盒 規格型號:96T/48T 人脂蛋白a試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋白a試劑盒、人脂蛋白a 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒 人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒 規格型號:96T/48T 人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒、人脂阿拉伯甘露聚糖試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人正常T細胞表達和分泌因子試劑盒 人正常T細胞表達和分泌因子試劑盒 規格型號:96T/48T 人正常T細胞表達和分泌因子試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人正常T細胞表達和分泌因子試劑盒、人正常T細胞表達和分泌因子試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
人整合素連接激酶1試劑盒 人整合素連接激酶1試劑盒 規格型號:96T/48T 人整合素連接激酶1試劑盒,規格型號:96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人整合素連接激酶1試劑盒、人整合素連接激酶1 試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豚鼠白介素8(IL-8)試劑盒 ,英文名: IL-8 ELISA Kit
Two adenosine monophosphate (ADP) ELISA Kit 人二0酸腺苷(ADP)試劑盒
rabbitSolubleprotein-100B,S-100BELISAKit 兔子S100B蛋白(S-100B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBeta-EPRELISAKit大鼠β內啡肽受體
細菌血液瓊脂平板50個(gè)
RabbitHeatShockProtein20,HSP-20ELISAKit兔熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規格:96T/48T
促黃體生成素受體抗體
鳥(niǎo)苷酸環(huán)化酶α2/GCS-α-2抗體
EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein
Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白
FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白
EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白
Melamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mgMelamine/BSA 三聚胺偶聯(lián)牛血清白蛋白
ING4 Protein Human 重組人 ING4 蛋白
EPHA4重組食蟹猴 EphA4 蛋白 Protein
EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白
FES重組人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠食管平滑肌細胞人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒
Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)試劑盒
Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應性生長(cháng)激素(irGH)試劑盒規格:96T/48T
組織基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
HumanleukocyteaigenA,HLA-AELISAKit人類(lèi)白細胞抗原A(HLA-A)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。