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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 雙極、多極形 | YS-01X7717 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著(zhù)每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細胞分布于中樞神經(jīng)系統,在銀浸染標本中,少突膠質(zhì)細胞比星狀膠質(zhì)細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱(chēng)為少突膠質(zhì)細胞或寡突膠質(zhì)細胞。少突膠質(zhì)細胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細胞祖細胞、前少突膠質(zhì)細胞祖細胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細胞發(fā)育是一個(gè)連續的過(guò)程,其形態(tài)、表達產(chǎn)物和功能的演變沒(méi)有嚴格的界限,因此,其分類(lèi)是相對的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細胞又稱(chēng)前O2A(pre-O2A progenitor cell)。細胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養時(shí)成簇生長(cháng)在星形膠質(zhì)表面,具有很強的分裂增殖潛力,表達GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細胞胞體常有雙極或三極突起,極少數為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養時(shí)為雙潛能細胞,既可分化為少突膠質(zhì)細胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱(chēng)為少突膠質(zhì)細胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達GM1和波形蛋白外還表達GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細胞。直徑約10μm。根據其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類(lèi)少突膠質(zhì)細胞。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標記物,同時(shí)也表達O1-O4抗原,無(wú)形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對軸突髓鞘化的能力。體外培養的少突膠質(zhì)細胞前體細胞(簡(jiǎn)稱(chēng)少突膠質(zhì)細胞前體細胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細胞,前兩者具有增殖能力。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)采用消化、混合細胞營(yíng)養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過(guò)專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×105cells/瓶
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養基 含B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次;
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 雙極、多極形
傳代特性 不傳代,不增殖,存活1-2周
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
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器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人著(zhù)絲粒蛋白B(CENPB)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CENPB (Cenomere Protein B) ELISA Kit
人中心體蛋白110(CEP110)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CEP110 (Cenosomal Protein 110kDa) ELISA Kit
人酶VB(CA5B)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CA5B (Carbonic Anhydrase VB, Mitochondrial) ELISA Kit
人絲切蛋白1(CFL1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Human CFL1(Cofilin 1, Non-Muscle) ELISA Kit
豚鼠白介素4(IL4)試劑盒 ,英文名: IL4 ELISA Kit
Human stem cell factor receptor (SCFR) ELISA Kit 人干細胞因子受體(SCFR)試劑盒
rabbitneuroophin3,-3ELISAKit 兔子神經(jīng)營(yíng)養因子3(-3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAVP(Humanargininevasopressin)ELISAKit人精加壓素
線(xiàn)粒體蛋白印跡電泳內參蛋白抗體(1000倍)20微克
Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit兔子抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒規格:96T/48T
ZYG11BL蛋白抗體
磷酸化原癌基因c-Raf抗體
FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類(lèi)皰疹病毒8抗原
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)
CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白
HHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P 0.5mgHHV8/ORF50(Human herpesvirus 8 type P) 人類(lèi)皰疹病毒8抗原
IP6K1 Protein Human 重組人 IHPK1 蛋白 (His & GST 標簽)
FCAR重組大鼠 CD89 / FCAR 蛋白 Protein
CA8 Protein Mouse 重組小鼠 Carbonic Anhydrase VIII / Car8 蛋白
EPOR重組人 EPO Receptor / EPOR 蛋白 Protein
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細胞兔兒茶酚胺(CA)ELISA 試劑盒
Human ypsinogen activation peptide (TAP) ELISA Kit 人原激活肽(TAP)試劑盒
Humanmorbillivirus,MVELISAKit 人麻疹病毒(MV)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanglathione,GSH試劑盒人(GSH)試劑盒規格:96T/48T
組織單胺氧化酶B型(MAO-B)活性熒光定量試劑盒20次
Humanmorbillivirus,MVELISAKit人麻疹病毒(MV)試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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