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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠氣管平滑肌細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
氣管 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7020 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠氣管平滑肌分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱(chēng)為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來(lái),環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結締組織連接,保持了持續張開(kāi)狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,以?xún)艋氲臍怏w。氣管平滑肌是氣管的重要結構組成之一,在機體的正常生理過(guò)程中發(fā)揮著(zhù)重要作用;能夠保持氣道張力,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,保持肺部通氣。氣管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見(jiàn)細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長(cháng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長(cháng),高低起伏;細胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長(cháng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(cháng)特點(diǎn)。氣管平滑肌細胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵。
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠氣管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合組織貼塊法制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠氣管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以?xún)葼顟B(tài)最佳
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人轉錄因子 英文名稱(chēng): Human Engrailed-2 規格: 英文縮寫(xiě): EN-2
E選擇素 英文名稱(chēng): Human E selectin 規格:
上皮鈣粘蛋白 英文名稱(chēng): Human E.cadherin 規格:
內皮素受體A 英文名稱(chēng): Human Endothelin Receptor A 規格: 英文縮寫(xiě): EA
豚鼠肝細胞生長(cháng)因子(HGF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human cytokeratin 18 (CK-18) ELISA Kit 人細胞角蛋白18(CK-18)試劑盒
Humanmicroansferrinuria,MTFELISAKit 人微量轉鐵蛋白(MTF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCyclinDependeKinase5,CDK5試劑盒人周期素依賴(lài)性激酶5(CDK5)試劑盒規格:96T/48T
組織FGFR4激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanPresenilin2,PS-2ELISAKit人早老素2(PS-2)試劑盒規格:96T/48T
Ras樣蛋白A抗體
磷酸化p38MAPK抗體
ARSA重組小鼠 Arylsulfatase A / ARSA 蛋白 Protein
c-Myc tag c-Myc tag標簽多肽 0.5mgc-Myc tag c-Myc tag標簽多肽
YWHAH重組人 14-3-3 eta / YWHAH 蛋白 (GST 標簽) Protein
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白
RTN4R Protein Mouse 重組小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白
c-Myc tag c-Myc tag標簽多肽 0.5mgc-Myc tag c-Myc tag標簽多肽
IL2RG Protein Human 重組人 IL2RG / CD132 蛋白
ARSA重組小鼠 Arylsulfatase A / ARSA 蛋白 Protein
RTN4R Protein Mouse 重組小鼠 Nogo Receptor / NOGOR / RTN4R 蛋白
YWHAH重組人 14-3-3 eta / YWHAH 蛋白 (GST 標簽) Protein
大鼠氣管平滑肌細胞兔子雌二醇(E2)ELISA 試劑盒
Human vascular endothelial cell growth factor (VEGF) ELISA Kit 人血管內皮細胞生長(cháng)因子(VEGF)試劑盒
Humanai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 人抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanerythropoiesisstimulatingfactor,ESF試劑盒人紅細胞刺激因子(ESF)試劑盒規格:96T/48T
組織RSK1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanOsteopoin,OPNELISAKit人骨橋素(OPN)試劑盒規格:96T/48T
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