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廠(chǎng)商性質(zhì):經(jīng)銷(xiāo)商
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更新時(shí)間:2025-04-09
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺組織 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7008 |
細胞簡(jiǎn)介:
大鼠Ⅱ型肺泡上皮分離自肺組織;肺泡由單層上皮細胞構成的半球狀囊泡。肺中的支氣管經(jīng)多次反復分枝成無(wú)數細支氣管,它們的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即為肺泡。小肺泡細胞,又稱(chēng)I型肺泡細胞,厚約0.1微米,基底部是基底膜,無(wú)增殖能力。大肺泡細胞,又稱(chēng)Ⅱ型肺泡細胞,分泌表面活性物質(zhì)(二棕櫚酰),以降低肺泡表面張力。Ⅱ型肺泡細胞位于Ⅰ型肺泡細胞之間,數量較Ⅰ型肺泡細胞多,但覆蓋面積比Ⅰ型肺泡細胞小。細胞立方形或圓形,頂端突入肺泡腔。細胞核圓形,胞質(zhì)著(zhù)色淺、呈泡沫狀。電鏡下,細胞游離而有少量微絨毛,胞質(zhì)內富含線(xiàn)粒體和溶酶體,有較發(fā)達的粗面內質(zhì)網(wǎng)和高爾基復合體。核上方有較多的分泌顆粒,電子密度高、大小不等,直徑約0.1-1.0μm顆粒內含有平行排列的板層狀結構,稱(chēng)為嗜餓性板層小體。小體內的主要成分為磷脂,以二棕櫚酰為主,此外還有糖胺多糖及蛋白質(zhì)等。顆粒內物質(zhì)釋放出來(lái)后,在肺泡表面形成一層粘液層,稱(chēng)為表面活性物質(zhì)(surfactant)。表面活性物質(zhì)有降低肺泡表面張力、穩定肺泡大小的作用。呼氣時(shí)肺泡縮小,表面活性物質(zhì)密度增加,表面張力降低,防止肺泡過(guò)度塌陷;吸氣時(shí)肺泡擴張,表面活性物質(zhì)密度減小,肺泡回縮力加大,可防止肺泡過(guò)度膨脹。表面活性物質(zhì)的缺乏或變性均可引起肺不張,過(guò)度通氣可造成表面活性物質(zhì)缺乏;吸入毒氣可直接破壞表面活性物質(zhì)。Ⅱ型肺泡細胞有分裂、增殖并分化為Ⅰ型肺泡細胞的潛能,故具有修復受損傷上皮的作用。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮采用彈性蛋白酶灌注消化法結合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細胞專(zhuān)用培養基培養篩選制備而來(lái),細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗室分離的大鼠Ⅱ型肺泡上皮經(jīng)SP-C免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養基 含FBS、生長(cháng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(cháng)特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養。1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀(guān)察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長(cháng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時(shí),棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個(gè)凍存管細胞數目大于1X106個(gè)細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養方法一般有以下4種:
① 組織塊培養法
組織塊培養是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著(zhù)于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長(cháng)。
?、?消化培養法
?、?懸浮細胞培養法
對于懸浮生長(cháng)的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養。
?、芷鞴倥囵B
器官培養是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養,器官培養可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀(guān)察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素 I (mouse ANG I) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 Phoenix
小鼠血管緊張素 II (mouse ANG II) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 Phoenix
mouse CD 40L ELISA Kit 作用: ELISA 規格: 96T 奧地利 Bender
大鼠 C 反應蛋白 (rat CRP) 作用: ELISA 規格: 96T 美國 ADI
小鼠仙臺病毒(Sendai)檢測試劑盒 96T/48T
Rat bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒
Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit 人蛋白酶3特異性抗中性粒細胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickenheparansulfate,HS檢測試劑盒雞類(lèi)肝素(HS)檢測試劑盒規格:96T/48T
載玻片細胞CDK4蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次
MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISAKit小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)檢測試劑盒規格:96T/48T
新型抑癌基因抗體
NF-kappa-B抑制子beta抗體
CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標簽)
IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)
1α(MEP1α)重組蛋白 Recombinant Meprin A Alpha (MEP1a)
CDC37 Protein Human 重組人 CDC37 / CDC37A 蛋白 (GST 標簽)
CCL2重組小鼠 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白 Protein
IgG Protein Rabbit 重組兔 IgG-Fc 蛋白 (185 Thr/Ala, Asn 284/Ser)
RIOK1重組人 RIOK1 / RIO kinase 1 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
大鼠Ⅱ型肺泡上皮細胞豬組織因子(TF)ELISA 試劑盒
Peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 人過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)檢測試劑盒
Rabbitalpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit 兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforApo-H(HumanApolipoproteinH)ELISAKit人載脂蛋白H
溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(100毫摩爾)1毫升
Porcinemyelinbasicprotein,MBPELISAKit豬髓0脂堿性蛋白(MBP)檢測試劑盒規格:96T/48T
原代細胞的培養條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養)培養
1、細胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養箱中培養;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養1周時(shí),應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養
1、原代培養時(shí)要盡量去除紅細胞;
2、短期培養,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養基中進(jìn)行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進(jìn)行分瓶試驗;
4、長(cháng)期培養時(shí),淋巴細胞中要加入生長(cháng)因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長(cháng);
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。