進(jìn)口ELISA試劑盒是一種敏感性高、特異性強、重復性好的ELISA試劑盒,其試劑安穩、易保留、操作簡(jiǎn)練、作用區分客觀(guān)等要素,適宜于大規模篩查實(shí)驗又能夠用于少數標本的檢查,能夠做定性實(shí)驗也能夠做定量分析。
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成*終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人心型脂肪酸結合蛋白(h-FABP)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長(cháng)下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
進(jìn)口ELISA試劑盒在確認收貨以后,不一定一次性就會(huì )用完,這就得需要把剩余的保存起來(lái),關(guān)于它的保存,這幾點(diǎn)一定要注意
一、要留意防止呈現嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團,其有類(lèi)似過(guò)氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA測定中,如血清標本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡(jiǎn)單在溫育過(guò)程中吸附于固相,然后與后面參加的HRP底物反響顯色。
二、樣本的收集及血清別離中要留意盡量防止細菌污染,一則細菌的生長(cháng),其所分泌的一些酶或許會(huì )對抗原抗體等蛋白發(fā)生分解效果;二則一些細菌的內源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會(huì )對用相應酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。
三、血清標本如是以無(wú)菌操作別離,則能夠在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則主張冰凍保存。樣本的長(cháng)期保存,應在-70℃以下。
四、冰凍保存的血清標本須留意防止因停電等造成的重復凍融。標本的重復凍融所發(fā)生的機械剪切力將對標本中的蛋白等分子發(fā)生破壞效果,然后引起假陰性成果。此外,凍融標本的混勻亦應留意,不要進(jìn)行劇烈振蕩,重復顛倒混勻即可。
五、標本在保存中如呈現細菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí),ELISA試劑盒應離心沉淀后取上清檢測。