開(kāi)心果源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒說(shuō)明書(shū)

概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過(guò)程中，隨著(zhù)PCR循環(huán)數的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會(huì )相應的增加，這樣就可以通過(guò)熒光強度的變化來(lái)對PCR反應進(jìn)行實(shí)時(shí)的監測。本公司根據您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針?lè )?。通過(guò)對DNA或RNA的熒光定量PCR監測, 實(shí)現基因的相對定量、定量和定性分析。
開(kāi)心果源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒PCR實(shí)驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無(wú)菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無(wú)熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線(xiàn)放線(xiàn)桿菌探針?lè )晒舛縋CR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長(cháng)期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μl進(jìn)行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

開(kāi)心果源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒注意事項：

1．基礎程序；

2．擴增溫度和延伸溫度；

3．反應時(shí)間；

4．循環(huán)次數；

5．PCR 反應液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應動(dòng)力學(xué)；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應體系與反應條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。
熒光定量PCR服務(wù)：

簡(jiǎn)介：實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問(wèn)題、自動(dòng)化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗結果等。我公司為您提供全套實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗皆使用進(jìn)口試劑完成，開(kāi)心果源性成分探針?lè )晒舛縋CR試劑盒主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請提供已知的全長(cháng)基因序列。

（03）請提供盡可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來(lái)源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗，進(jìn)行實(shí)驗結果分析。

（04）實(shí)驗完成后，提供完整的實(shí)驗報告（含軟件分析結果）及引物等實(shí)驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標準：

  我公司根據客戶(hù)的樣品數量進(jìn)行不同的收費標準。