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日期:2024-03-26瀏覽:248次
共價(jià)結合型果膠(CSP)含量可見(jiàn)分光光度法測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時(shí)間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗臺上,以便 不時(shí)觀(guān)察,待對照管顯色適當時(shí),即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應步驟,但卻 是決定實(shí)驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。